Хламидиоз бактерия или вирус

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – метод высокой точности обнаружения конкретных возбудителей инфекций

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – метод высокой точности в области диагностирования наследственных патологий, инфекций, вирусных болезней в любой стадии (острой или хронической), а также — на раннем этапе — до очевидных проявлений болезни путем идентификации возбудителей, на основе их ДНК, РНК, являющихся генетическим материалом, в пробах, которые получают от пациента. И сегодня мы поговорим про суть, этапы диагностики и принципы методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), а также о ее стоимости.

Что такое полимеразная цепная реакция

Основа анализа — амплификация (удвоение) – создание множества копий из короткого участка ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты), представляющей генетический комплекс человека. Для исследования нужно очень малое количество физиологического вещества (мокрота, каловые массы, соскоб эпителия, сок простаты, кровь, сперма, околоплодные воды, слизь, ткань плаценты, моча, слюна, жидкость плевральная, цереброспинальная). При этом, например, в мочеполовом тракте больного возможно обнаружение даже единичного вредоносного микроба.

• в раннем диагностировании инфекций, генетических, онкологических патологий;
• в судебно-медицинской экспертизе при наличии для исследования крайне малого количества ДНК;
• в ветеринарной медицине, фармацевтике, биологии, молекулярной генетике;
• для идентификации личности по ДНК, подтверждения отцовства;
• в палеонтологии, антропологии, экологии (при отслеживании качества продуктов, факторов внешней среды).

О том, что такое полимеразная цепная реакция, расскажет в подробностях данное видео:

Кому ее назначают

Полимеразная цепная реакция в диагностике инфекционных заболеваний — одна из наиболее надежных методик особой точности и достоверности. К примеру, достоверность проведенного анализа ПЦР на хламидии и на многие другие патогены приближается к 100% (абсолютная). Чаще всего процедуру полимеразной цепной реакции назначают пациентам, у которых при диагностировании возникают сложности с идентификацией конкретного возбудителя.

Лабораторный тест ПЦР применяют:

• для обнаружения болезнетворных организмов, вызывающих инфицирование мочевыводящих и половых органов, трудно идентифицируемых при использовании посевов или методов иммунологии;
• для повторного диагностирования ВИЧ на начальной стадии в случае положительного, но вызывающего сомнения результата первичного анализа (например, у новорожденных от инфицированных СПИДом родителей);
• для установления онкологического заболевания на раннем этапе (изучение мутаций онкогенов) и индивидуальной коррекции схемы лечения у конкретного пациента;
• с целью раннего выявления и потенциального лечения наследственных патологий.

Так, будущие родители сдают анализ, чтобы узнать, являются ли они носителями генетической патологии, у детей ПЦР определяет вероятность подверженности болезни, передающейся по наследству.

• для обнаружения патологий плода на раннем сроке вынашивания (отдельные клетки растущего эмбриона исследуют на наличие возможных мутаций);
• у пациентов перед трансплантацией органов – для «тканевого типирования» (определения совместимости тканей);
• для выявления опасных патогенных организмов в донорской крови;
• у новорожденных малышей – для выявления скрытых инфекций;
• для оценки результатов антивирусного и антимикробного лечения.

Зачем проходить такую процедуру

Поскольку ПЦР — высокоэффективный способ диагностики, дающий почти 100% результат, процедуру используют:

• для подтверждения или исключения окончательного диагноза;
• быстрой оценки эффективности проводимой терапии.

Во многих случаях ПЦР — единственно возможный тест для обнаружения развивающегося заболевания, если прочие бактериологические, иммунологические и вирусологические методики диагностирования оказываются бесполезными.

• Вирусы обнаруживаются с помощью процедуры ПЦР сразу после инфицирования и до появления признаков болезни. Раннее выявление вируса позволяет оперативно назначить лечение.
• Так называемая «вирусная нагрузка» (или — количество вирусов в организме) также определяется при анализе ДНК количественным методом.
• Конкретные болезнетворные организмы (например, туберкулезную палочку Коха) сложно и слишком долго культивировать. Анализ ПЦР позволяет быстро выявить минимальное количество патогенов (живых и мертвых) в образцах, удобных для исследования.

Подробный анализ ДНК патогена используется:

• чтобы определить его чувствительность к конкретным видам антибиотиков, что позволяет немедленно приступить к лечению;
• чтобы контролировать распространение эпидемий среди домашних, диких животных;
• чтобы выявить и отслеживать новые заразные виды микробов и подтипы патогенов, которые спровоцировали предыдущие эпидемии.

Виды диагностики

Стандартный метод

Анализ полимеразно-цепной реакции проводится на основе многократной амплификации (удвоения) конкретного фрагмента ДНК и РНК при использовании особых ферментов-праймеров. В результате цепочки копирования получается количество материала, достаточное для исследования.

В ходе процедуры копируется только искомый фрагмент (соответствующий заданным конкретным условиям) и в случае, если он действительно присутствует в пробе.

О том, как проходит ПЦР, рассказывает это подробное видео с полезными схемами:

• ПЦР , проводимая в режиме реального времени. В этом виде исследования процесс выявления заданного фрагмента ДНК запускается после прохождения каждого цикла, а не после осуществления всей цепочки 30 – 40 циклов. Этот вид исследования позволяет получить информацию о количестве патогена (вируса или микроба) в организме, то есть осуществлять количественный анализ.
• ОТ-ПЦР (режим обратной транскрипции). Этот анализ используют, чтобы найти РНК с одной цепочкой для обнаружения вирусов, генетической базой которых является именно РНК (например, вирус гепатита С, иммунодефицита). При таком исследовании используется особый фермент — обратная транскриптаза и определенный праймер и на базе РНК строится одноцепочная ДНК. Затем из этой цепочки восстанавливают вторую цепь ДНК и выполняется стандартная процедура.

Показания для проведения

Процедура ПЦР применяется в клинике инфекционных болезней, неонатологии, акушерстве, педиатрии, урологии, гинекологии, венерологии, неврологии, нефрологии, офтальмологии.

Показания для назначения анализа:

• выяснение риска развития генетических отклонений у ребенка при вероятности наследственных патологий;
• диагностирование обоих родителей при планировании беременности или тяжелом состоянии матери при протекающей беременности;
• трудности с зачатием, выявление причин бесплодия;
• подозрение на половые инфекции в острой стадии и при симптоматике перехода их в хроническую;
• обнаружение причин воспалительных процессов неясного происхождения;
• незащищенные случайные и постоянные половые контакты;
• определение чувствительности патогенного микроорганизма к конкретным антибиотикам;
• пациентам с подозрением на скрытую инфекцию для обнаружения патогенов до развития явной симптоматики (доклиническое диагностирование);
• больным для подтверждения выздоровления после болезни (ретроспективная диагностика);:

Также используется диагностика при необходимости точного выявления следующих возбудителей::

• вирусы гепатита (A B C G), иммунодефицита человека, цитомегаловирус;
• вибрион холерный;
• вирус простого герпеса, герпетиформные виды;
• ретро – адено – и риновирусы;
• вирусы краснухи, Эпштейна-Барр, варицелла (Зостер – вирус);
• парво – и пикорновирусы;
• вирус папилломы;
• онкогенные вирусы;
• бактерия Helicobacter pylori;
• легионеллы, патогенные типы палочки кишечной;
• стафилококк золотистый;
• возбудитель менингита;
• клостридии, дифтерийная и гемофильная палочка;

Используется и для определения инфекций:

• инфекционный мононуклеоз;
• боррелиоз, листериоз, клещевой энцефалит;
• кандидоз, вызываемый грибками Candida;
• половые инфекции – трихомониаз, уреаплазмоз, бледная трепонема, гарднереллез, гонорея, микоплазмоз, хламидиоз;
• туберкулез.

Противопоказания для проведения

Поскольку процедура проводится не с пациентом, без какого-либо воздействия на организм, а с биологическим материалом, взятым для исследования, то никаких противопоказаний для ПЦР не имеется по причине отсутствия потенциальной опасности.

Однако забор биоматериала из шеечного канала матки не проводят после процедуры кольпоскопии. Сдача мазков, соскобов на анализ разрешена только через 4 – 6 дней после окончания менструации и полного прекращения выделений.

Безопасен ли метод

Никакое негативное влияние на пациента при изолированном исследовании его биоматериала в лабораторных условиях невозможно.

Подготовка к процедуре (сдача биологических веществ на анализ)

В качестве образца для анализа ПЦР, при котором выявляют ДНК чужеродного патогена, служит любая биологическая жидкость, ткань, выделения организма. Забор исследуемого вещества проводят в виде взятия крови из вены, соскоба из гортани, полости носа, мочеиспускательного канала, плевральной полости, шейки матки.

Перед диагностической процедурой врач объясняет пациенту, забор какого материала будет взят:

1. При обследовании на половые инфекции, производится забор выделений из половых органов, моча, мазок из уретры.
2. При анализе на герпетические инфекции, цитомегаловирус, мононуклеоз – берут на анализ мочу, мазок из зева, на гепатит, токсоплазмоз — кровь из вены.
3. С целью диагностирования различных видов поражений нервной системы проводится забор спинномозговой жидкости.
4. В пульмонологии образцы для анализа — мокрота и жидкость плевральная.
5. Когда проводят исследование возможных внутриутробных инфекций при вынашивании плода для анализа используют околоплодные воды и клетки плаценты.

Грамотная подготовка к сдаче биоматериала не представляет для пациентов никаких трудностей. Имеются определенные рекомендации:

• при анализе на половые инфекции:
  • исключить интимные контакты за 72 часа до сдачи материала;
  • прекратить использование любых вагинальных средств за 3 суток;
  • с вечера предыдущего дня не проводить гигиену исследуемой области;
  • исключить мочеиспускание за 3 – 4 часа при взятии пробы из уретры;
• прекратить прием антибиотиков за месяц до сдачи анализов на инфекции;
• кровь сдают утром до принятия еды и питья;
• сбор первой утренней порции мочи проводится в стерильный контейнер после тщательного интимного туалета.

О том, как проводится диагностика по методике полимеразной цепной реакции, читайте ниже.

Как проходит процедура

При выполнении исследования ПЦР раз за разом в реакторе (амплификаторе или термоциклере) повторяются определенные циклы:

1. Первый шаг – денатурация. Слюну, кровь, биоптат, гинекологические пробы, мокроту, в которых подозревается присутствие ДНК (или РНК) патогена, помещают в амплификатор, где происходит нагревание материала и расщепление ДНК на две отдельные цепочки.
2. Второй шаг – отжиг или небольшое охлаждение материала и добавление к нему праймеров, способных распознавать нужные участки в молекуле ДНК и связываться с ними.
3. Третий шаг – элонгация – происходит после присоединения 2 праймеров к каждой из цепочек ДНК. В ходе процесса фрагмент ДНК патогена достраивается, и формируется его копия.

Эти циклы повторяются по типу «цепной реакции», каждый раз приводя к удвоению копий специфичного фрагмента ДНК (например, отрезка, где запрограммирован определенный вирус). За несколько часов образуется множество копий фрагмента ДНК, и выявляется их присутствие в образце. После этого проводят анализ и сравнение результатов с данными базы различных видов патогенов, чтобы определить вид инфекции.

Смотрите так же:  Что такое краснуха и как она выглядит у взрослых

Про расшифровку результатов и вывод исходя из ПЦР-реакции читайте ниже.

Расшифровка результатов

Окончательный результат исследования выдается через 1 – 2 суток после сдачи биологического материала. Нередко – уже в первые сутки после анализа.

Качественный анализ

• Отрицательный результат означает, что в веществе, сданном на исследование, следов возбудителей инфекции не обнаружено.
• Положительный результат означает выявление патогенных вирусов или бактерий в биологическом образце с очень высокой степенью точности на момент сдачи материала.

Если результат положительный, но признаков активизации инфекции не выявлено – такое состояние организма называют бессимптомным «здоровым носительством». Чаще всего наблюдается при взятии биоматериала из определенного места (цервикальный канал, уретра, полость рта) при вирусных заболеваниях. Лечения в этом случае не требуется, но обязательно постоянное врачебное наблюдение, поскольку существует вероятность:

• распространения вируса от носителей и заражение здоровых людей;
• активизации процесса и переход заболевания в хроническую форму.

Количественный анализ

Количественный результат определяет специалист конкретно для определенного вида инфекции. На его основании можно оценить степень развития, стадию болезни, что дает возможность оперативно назначить правильное лечение.

Средняя стоимость

Цены на проведение полимеразной цепной реакции определяют: вид исследования, сложность идентификации возбудителя, трудность забора биологического материала, вид анализа (качественный или количественный), уровень цен в лаборатории.

С другой стороны, при исследовании ПЦР можно определить сразу несколько патогенов при заборе одного вида материала для анализа. Это позволяет сэкономить на других лабораторных анализах.

Ориентировочно, стоимость анализа ПЦР в рублях:

• гонококк, гарднерелла, трихомонада вагиналис – от 180
• хламидия трахоматис – от 190
• папилломавирус – от 380 до 500
• биоценоз урогенитального тракта у женщин (количественная и качественная оценка микрофлоры) – от 800.

Еще больше полезной информации в отношении исследования ПЦР содержится в видеосюжете ниже:

История сифилисастрашно интересные факты о болезни

Сифилис сопровождает человечество многие сотни лет. В медицине, литературе и истории он стал одной из самых «знаменитых» болезней, и даже повлиял на судьбы выдающихся людей. Как же возник сифилис в мире, какие эпидемии вызвал в прошлом, кто из знаменитостей пострадал от него в разное время — рассказываем необычные и интересные факты о сифилисе.

Содержание статьи:

Возникновение сифилиса в мире

Многие десятилетия в научном мире идут споры о том, откуда произошел сифилис. Есть три основные теории на эту тему — американская, африканская и европейская.

Американская теория

Американская теория предполагает, что в Европу сифилис привезли моряки с корабля Колумба, которые заразились в открытой ими Америке. Интересно, что в Америке действительно есть несколько заболеваний скота, которые вызывают похожие бактерии.

Считается, что сначала этими заболеваниями могло заразиться коренное население — через распространенное среди местных племен скотоложество. Затем в организме человека этот «предсифилис» приобрел свои классические черты, а уже заразившиеся от аборигенов моряки разнесли сифилис по европейским портовым городам.

Однако эта теория не может объяснить характерные сифилитические изменения в останках людей, живших задолго до эпохи Колумба. Не объясняет она и то, что описания сифилиса и методы лечения ртутью историки не раз находили в древних текстах — например, в древнегреческих, египетских и персидских документах.

Африканская теория

По второй теории, родиной сифилиса является Африка, где до сих пор существует похожее заболевание — фрамбезия, или не-венерический сифилис. Фрамбезия, как и обычный сифилис, проникает в организм человека через мелкие травмы кожи или слизистой. В раннем периоде болезнь вызывает множественные высыпания на коже, а в позднем — образует узлы и гуммы, сходные с сифилитическими.

Не-венерический сифилис вызывается другим подвидом трепонемы — Treponema pertenue Castellani.

Возможно, параллельной ветвью развития фрамбезии и стал сифилис. Предполагается, что благодаря работорговле, процветавшей в древних государствах, болезнь могла быстро распространиться по территории Греции, Египта, Персии, Рима и других стран, а позже оттуда пришла в Европу.

Европейская теория

Наконец, третья — европейская теория происхождения сифилиса — гласит, что эта инфекция вообще является ровесником человечества. Эту версию поддерживают специалисты, изучавшие останки людей, живших две и более тысячи лет до нашей эры, в бронзовом периоде. На этих останках ученые обнаружили разрушения костей, вызванные сифилитическими язвами, а также характерные для симптомов сифилиса изменения черепа и зубов. Такие останки были обнаружены и на территории Российской Федерации.

Поэтому не исключено, что сифилис сопровождает человечество практически с момента становления, и найти какой-то определенный источник болезни ученым не удастся.

Эпидемии сифилиса

Войны, голод и другие катаклизмы всегда служили «спусковым крючком» для эпидемий разных тяжелых инфекций. То же самое не раз происходило и с сифилисом. Перечислить все случаи эпидемий сифилиса за долгую историю человечества невозможно. Но давайте посмотрим, какие масштабные вспышки вызывал сифилис в средневековье на территории Европы и России.

Первая известная эпидемия сифилиса в Европе

В 16 веке появилась поэма про пастуха Сифила – первое литературное описание сифилиса

Одна из первых эпидемий сифилиса в Европе началась в 15-16 веках, когда французский король Карл VIII двинулся со своей армией на Неаполь. Сама эта война прошла относительно бескровно — французские войска не встретили особого сопротивления среди итальянцев, и Неаполь был взят. Но «наградой» за победу для армии Карла стал сифилис, которым французских солдат заразили в захваченных землях.

Двигаясь обратно домой, по пути мародерствуя и бесчинствуя, французские военные разносили сифилис по всей Европе, за что эта болезнь еще долгие годы называлась французской. В итоге сифилис стал острейшей проблемой не только среди простого населения Европы, но и среди знати. Его лечением тщетно занимались алхимики и лекари.

В начале 16 века была даже написана поэма про пастуха Сифила. Она стала первым научно-популярным описанием этой венерической болезни. В поэме рассказывалось о несчастном пастухе, которого боги наказали страшными язвами за неуважение к небесным силам и дурное поведение. Лечить пастуха предлагалось в ртутных озерах.

Реальные и полезные факты о лечении сифилиса можно узнать в статье «Лечение сифилиса: общие принципы».

Эпидемии сифилиса в России

Через пару сотен лет сифилис закончил шествие по Европе и добрался до России. Здесь его распространение пытались контролировать на высочайшем государственном уровне: женщин, занятых проституцией, приказано было принудительно обследовать и лечить, больных сифилисом — высылать из городов, чиновники принимали и другие противоэпидемические меры. Не допустить эпидемий сифилиса в России особенно старалась Екатерина Великая. Увы, нельзя сказать, что ее усилия дали положительный эффект.

В первой воловине 19 века великий врач Н.И. Пирогов отмечал, что профилактика сифилиса в России неэффективна, потому что на деле практически отсутствует. Несмотря на то, что во многих российских медуниверситетах открылись кафедры венерологии и сифилидологии и появились врачи по этой специальности, распространённость сифилиса продолжала расти.

К середине 19 века сифилис был уже довольно широко распространен среди военных. Заболеваемость им в армии составляла до 58 человек на 1000. А к концу 19 века среди всех госпитализированных гражданских лиц сифилис выявляли у каждого десятого пациента.

К началу 20 века среди военных от сифилиса страдал уже каждый пятый. Разумеется, болезнь продолжала распространяться и среди гражданского населения. Особенно страдали села, где сифилисом могли болеть целые семьи. Катастрофической ситуация стала после революции, когда из-за беспорядков и голода в 1920-1930 годах сифилис поражал уже целые села.

Здесь нельзя не отметить эпидемию сифилиса на западной Украине, в том числе в Галиции. Эту вспышку вызвали упадок производства и страшная безработица на указанных территориях. Сифилис на Украине поражал до 80% населения в отдельных областях, несмотря на усилия земских врачей. Эпидемия на Украине хорошо описана у М. Булгакова в цикле «Записки молодого врача».

Благодаря открытию антибиотиков, к началу второй мировой войны заболеваемость сифилисом несколько снизилась, дальнейшее снижение отмечалось и в военные годы.

Начало эры антибиотиков позволило победить эпидемию сифилиса в СССР. К 1980 годам показатель заболеваемости составлял всего 7 заболевших на 100 000 населения! Однако уже в 1990 годы настороженность врачей и знания о сифилисе среди населения снизились. В добавок к этому в распавшемся СССР разразилась эпидемия ВИЧ. Всё это спровоцировало новый рост заболеваемости сифилисом в России, который продолжается до сих пор.

За последние десять лет заболеваемость сифилисом в РФ возросла в более чем 30 раз, и к концу 20 века составляла уже до 300 случаев на 100 000 человек.

В 21 веке мы имеем дело с последствиями этой эпидемии. Ее отличительная особенность — обилие «стертых» (неясных), поздних и малосимптомных форм. К сожалению, болезнь часто обнаруживают уже на стадии поздних и практически неизлечимых нарушений. Подробнее об этом можно почитать в статьях «Нейросифилис» и «Все стадии сифилиса кратко».

Как болели сифилисом в 19 веке

До изобретения антибиотиков остановить течение болезни было трудно, и она уродовала и калечила жизни людей вне зависимости от их социального статуса. Давайте представим себе человека из 19 века, больного сифилисом уже в течение 15 лет. Как бы он выглядел?

Это был бы человек с небезызвестным «седловидным» или полностью разрушенным носом, глубокими язвами на лице, с деформированным языком, твердым и мягким небом. Из-за множественных поражений у такого человека могли возникать проблемы с речью, глотанием, дыханием. Из-за поражения нервной системы и внутренних органов и больного мог развиться нейросифилис со множественными неврологическими проявлениями, миокардит, аортит, поражение желудка, печени, костей и суставов.

Самыми эффективными лекарствами в отношении сифилиса считали такие токсичные вещества, ртуть и мышьяк. Пациенты вдыхали испарения ртути и дышали дымом, образующимся при горении мышьяка. Безусловно, бледная трепонема (бактерия, вызывающая сифилис) при таких условиях непременно погибала, как, собственно и человек. Эти ядовитые пары приводили к облысению, выпадению зубов, появлению на коже язв и полному безумию человека, так как его нервная система от такого лечения стремительно разрушалась.

Кто из известных людей болел сифилисом

В истории есть данные о множестве известных личностей, умерших от сифилиса в разные годы. В их числе папы римские, правители государств, известные ученые, философы и писатели.

Смотрите так же:  Какие породы кур на птицефабриках

К примеру, считается, что знаменитый российский царь Иван Грозный страдал от сифилиса. В пользу этой версии говорят приступы агрессии, которыми отличался правитель, а также следы ртути, найденные в его останках. В те времена ртуть была единственным сколько-нибудь эффективным лекарством от сифилиса. Приписывают эту болезнь и Христофору Колумбу — если вспомнить американскую теорию, то именно он и его команда привезли сифилис в Европу из Америки.

Многим до сих пор любопытно, кто из знаменитостей прошлого на самом деле болел сифилисом. И хотя почти ни о ком из них нельзя сказать этого с уверенностью, некоторые «улики» могут натолкнуть на эту мысль.

Владимир Ленин и сифилис

Болел ли сифилисом Владимир Ленин — вопрос, который до сих пор волнует врачей и историков. В последние годы жизни Ленин страдал от нарастающих психических нарушений. Помимо них, его мучили проблемы с ходьбой и паралич правой руки. Эти симптомы могут быть характерны для позднего сифилиса нервной системы.

Также известно, что врачи, которых вызывали к вождю, специализировались именно на сифилисе. По некоторым данным, в Кремль систематически поставляли препараты висмута, которые как раз применялись для лечения сифилиса.

Однако в отчете о вскрытии тела Владимира Ильича говорится, что характерных для сифилиса изменений у него найдено не было. Возможно, эти данные скрыли от общественности, чтобы сохранить светлый образ вождя среди простого народа. До сих пор неизвестно, сифилис ли послужил причиной смерти Ленина. И хотя выяснить это технически довольно просто (мозг вождя все еще хранится в бывшем Институте мозга), точка в этом вопросе до сих пор не поставлена.

Адольф Гитлер и сифилис

Второй известной фигурой того времени, чье имя связывают с люэсом (устаревшее название сифилиса), является Адольф Гитлер. Доказательств, говорящих о том, что у Гитлера действительно были какие-либо симптомы сифилиса, у биографов нет, как и вообще любых данных из истории болезни германского лидера.

Вся информация о Гитлере тщательно скрывалась, а медосмотры он не проходил с ранней молодости. Нам остаются только слухи. Согласно им, Гитлер посвятил изрядную часть своего произведении «Mein Kampf» (Моя Борьба) именно сифилису и борьбе с евреями, как его разносчиками, потому что сам в юности подхватил сифилис от некой еврейки. Но документального подтверждения этим домыслам не найдено.

Владимир Маяковский и сифилис

Известно, что талантливый поэт Владимир Маяковский умер от выстрела, и возможно, это было самоубийство. Некоторые биографы идут еще дальше и предполагают, что причиной, толкнувшей великого поэта к такому шагу, мог быть сифилис.

Маяковский вел довольно свободную жизнь, отличался большим количеством связей, да и вообще нравы творческой интеллигенции в те времена нельзя назвать строгими. Интересно, что в стихах Маяковского также упоминается сифилис, но страдал ли от него сам поэт, или в его творчестве просто отразилась актуальная проблема того времени, мы не знаем.

Возможно, ученым так и не удастся точно установить, как давно сифилис сопровождает человечество. Но как бы там ни было, эта болезнь уже очень давно доказала, насколько она серьезна и опасна.

К сожалению, сегодня многие думают, что сифилис – такой же пережиток прошлого, как чума или холера, и что случаи этой болезни в наши дни – какая-то редкостная экзотика. Увы, это очень опасное заблуждение: не понимая всего коварства сифилиса и других венерических болезней и не соблюдая меры предосторожности, люди повышают для себя риск заражения.

О том, как происходит заражение сифилисом и как правильно защититься от него, читайте в отдельном материале.

Метод забора материала для ПЦР

Чаще всего на ПЦР отправляют соскобы со слизистой половых путей, и этот анализ является самым точным из всех имеющихся на сегодняшний день средств диагностики ЗППП. Редко приходится делать ПЦР крови, мочи, слюны и других биологических жидкостей.

Техника исполнения анализа

Под действием определенных реактивов ДНК бактерий в материале, отправленном на анализ, увеличивается во много раз и становится различимой и идентифицируемой для приборов.

Значение результатов анализа

ПЦР всегда качественный анализ, то есть ответом может быть только “обнаружено” или “не обнаружено”. Расшифруем, что кроется за этими значениями. “Обнаружено”, или “положительно”, или просто “+” – из исследуемого материла выделена ДНК соответствующей бактерии, и с вероятностью 97% можно сказать, что человек заражен этой инфекцией. “Не обнаружено”, “отрицательно”, “-” – из исследуемого материала ДНК соответствующей бактерии не выделено, с вероятностью 97% можно утверждать, что большого количества этих бактерий в организме пациента нет, с вероятностью 60% – что пациент не заражен этой инфекцией.

Для того, чтобы бактерия попала в пробирку с материалом, отправляемым на анализ, необходимо, чтобы она содержалась в организме человека в определенном количестве. Если количество бактерий в организме человека минимально, они почти наверняка в пробирку не попадут, и результат анализа придет отрицательный. Однако человек при этом все равно инфицирован и болен. Поэтому для максимального увеличения точности результата перед проведением ПЦР-диагностики требуется специальная подготовка.

ВЫСОКАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ И СПЕЦИФИЧНОСТЬ

ПЦР – метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций “золотым стандартом”, проверен временем и тщательно апробирован клинически.

Необычайная чувствительность метода позволяет нашим специалистам гарантированно обнаруживать единичные возбудители в биологическом материале на основе их генетической информации. Аналитическая чувствительность АмплиСенс ПЦР-тест-систем для большинства вирусов и бактерий – воспроизводимое выявление 100 микроорганизмов в исследуемой биологической пробе (1000 МИКРООРГАНИЗМОВ В 1 МЛ)

Специфичность ПЦР при использовании технологии АмплиСенс даже для всех вирусных, хламидийных, микоплазменных, уреаплазменных и большинства других бактериальных инфекций достигает 100%.

Забор биологического материала для лабораторных исследований методом ПЦР

Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа “Venoject” (с ЭДТА). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в одноразовую пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9. Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя), пробирка закрывается пробкой и переворачивается несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом). Пробирка с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С – +8°С.

Максимальный срок хранения:

При исследовании на вирусные гепатиты – 2 суток

При исследовании на другие инфекции – 5 часов

Для анализа отбирается первая порция утренней мочи в количестве 10 мл в специальный флакон или пробирку без консервирующего раствора.

Максимальный срок хранения отобранного материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С.

Перед забором слюна производится трехкратное полоскание полости рта физиологическим раствором. Забор слюны производится в одноразовые пробирки в количестве 3-5 мл.

Материал необходимо отбирать непосредственно перед исследованием или немедленно доставлять в лабораторию. При невозможности быстрой доставки материал замораживают при –20 °С. Последующая транспортировка осуществляется в замороженном состоянии (в термосе со льдом).

Мазок из ротоглотки

Забор материала производится рабочей частью стерильного одноразового аппликатора с задней стенки глотки и крипт миндалин. После забора материала аппикатор помещают в стерильную одноразовую пробирку.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Мокрота и плевральный выпот

Материал отбирают в специальные флаконы в количестве 5-10 мл.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Биопсийный материал помещают сухую одноразовую пробирку типа “Эппендорф”.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Забор материала производится одноразовым шприцом в количестве 1 мл. Отобранный материал помещают в сухую одноразовую пробирку типа “Эппендорф”.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Забор материала для анализа на урогенитальные инфекции

Забор материала у женщин:

Соскоб производится из трех различных точек:

задний свод влагалища

При необходимости материал для исследования берется из генитальных язв (исследование на HSV-II, Haemophilus ducrei).

Забор производится универсальным зондом или ложкой Фолькмана. Если соскоб взят универсальным зондом, рабочая часть зонда, содержащая исследуемый материал, отрезается или обламывается и помещается в одноразовую пробирку типа “Эппендорф” с консервирующим раствором. Если забор производится ложкой Фолькмана, рабочая часть инструмента споласкивается в консервирующем растворе, содержащемся в одноразовой пробирке типа “Эппендорф”.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Забор материала у мужчин:

Забор материала производится универсальным зондом из уретры. При необходимости материал для исследования берется из генитальных язв (исследование на HSV-II, Haemophilus ducrei).

Рабочая часть зонда, содержащая исследуемый материал, отрезается или обламывается и помещается в одноразовую пробирку типа “Эппендорф” с консервирующим раствором.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Сок предстательной железы:

После окончания массажа предстательной железы сок в количестве 0,5-1 мл собирают в одноразовую сухую пробирку типа “Эппендорф”. При невозможности получить сок, сразу после массажа собирают первую порцию мочи (в которой содержится сок предстательной железы) в количестве 10 мл (правила забора мочи смотрите выше).

Максимальный срок хранения 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Забор и хранение биологического материала (кровь) для исследований методом ИФА (инфекции)

Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа “Venoject” (с ЭДТА или без). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в одноразовую “сухую” пробирку или в пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9).

Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С – +8°С.

Максимальный срок хранения сыворотки при температуре +4°С – +8°С – 48 часов

Максимальный срок хранения сыворотки при температуре -20°С – длительное хранение.

Смотрите так же:  Какие лекарства можно кормящей маме при гриппе

Забор и хранение биологического материала (кровь) для исследований на сифилис (Syphilis RPR, Syphilis TPHA, Syphilis TPHA (полуколичественный анализ), определения в сыворотке концетрации гормонов, онкомаркёров, аутоантител методом ИФА и для биохимических исследований

Забор крови производится:

Утром натощак (при динамическом наблюдении – всегда в одни и те же часы);

Только в “сухую” пробирку или специальную коммерческую вакуумную систему без антикоагулянта.

Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в сухую пробирку объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа “Venoject” (без антикоагулянта). Забор шприцом нежелателен в связи с опасностью возникновения гемолиза.

Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С – +8°С.

Максимальный срок хранения сыворотки при температуре +4°С – +8°С – 48 часов.

Максимальный срок хранения сыворотки при температуре -20 °С – длительное хранение.

Допускается только однократная разморозка сыворотки.

Забор крови для определения субпопуляций и функциональной активности лимфоцитов и нейтрофилов

Забор крови производится:

Утром натощак (5 мл крови).

Для предотвращения свёртывания в кровь при взятии добавляют антикоагулянт: 20 единиц гепарина на 1 мл крови. Лучше использовать стандартные пробирки с гепарином (ВАКУТАЙНЕР на-гепарин или ли-гепарин на 5-7 мл с зелёными крышками фирмы Becton Dickinson).

Перед взятием крови равномерно распределить гепарин по стенкам пробирки.

При взятии шприцем, во избежании гемолиза, кровь в пробирку спускать плавно, без напора.

После взятия пробирку с образцом несколько раз перевернуть. Не встряхивать и не крутить на шейкере.

Кровь должна храниться не более 48 часов при комнатной температуре

При перевозке температура крови должна быть +18 °С – +24 °С

Для определения иммуноглобулинов и ЦИК в сыворотке крови,

забор крови производится только в сухую пробирку.

Условия забора и перевозки те же.

Забор и хранение биологического материала (кровь) для определения группы крови по системе AB0 и Резус-фактора

Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа “Venoject” (с ЭДТА). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в одноразовую пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9).

Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С – +8°С.

Забор и хранение биологического материала (моча) для определения суточной экскреции 17-КС

Утренняя моча сбрасывается, следующие порции мочи, включая утреннюю порцию следующего дня, собираются в отдельную посуду. Объём собранной мочи перемешивается, измеряется(!). В баночку отливается 50 мл мочи.

Доставка образца с указанием диуреза – в те же сутки.

При более длительном хранении (более суток) требуется заморозка.

Забор исследуемого материала для бактериологических исследований

ОТДЕЛЯЕМОЕ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА.

Правила подготовки больного к исследованию и забора материала:

Материал для исследования у женщин следует брать перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания. Рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 3-4 часов и половых сношений перед взятием материала.

Женщины в день явки на обследование не должны спринцеваться и проводить туалет наружных половых органов.

Исследуемый материал берут специальными одноразовыми зондами, ложкой Фолькмана, бактериологической петлей либо ушным зондом с затупленным концом.

За 5-7 дней до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Исследуемый материал должен быть без примесей крови.

При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять один из следующих методов провокации:

биологическая: введение гоновакцины (500 млн. микробных тел) взрослым однократно, внутримышечно, детям старше 3-х лет- 100-200 млн. микробных тел. Детям до 3 лет не рекомендуется введение гоновакцины;

термическая: применение в течение 3-х дней диатермии с абдоминально-вагинально-сакральным расположением электродов по 30,40,50 мин или индуктотермии по 10,15,20 мин. Следует производить забор отделяемого из уретры, цервикального канала и прямой кишки через один час после каждого прогревания;

механическая: наложение металлического колпачка на шейку матки женщин на 4 часа, проведение массажа уретры мужчин на буже в течение 10 мин;

алиментарная: употребление соленой, острой пищи и алкоголя за 24 часа до исследования.

Не следует проводить химические провокации, так как они губительно действуют на некоторых возбудителей.

Забор материала производят после провокации и через 24-48-72 ч.

Взятие материала проводит врач акушер-гинеколог при подозрении на инфекционную природу патологического процесса.

Содержимое цервикального канала, полости и придатков матки в норме стерильно.

Рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов и более перед взятием материала.

Перед взятием материала наружное отверстие уретры необходимо обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором.

При наличии гнойных выделений соскоб надо брать либо сразу, либо через 15-20 мин после мочеиспускания, при отсутствии выделений следует провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала.

У женщин перед введением зонда в уретру необходимо провести ее массаж о лобковое сочленение.

В уретру женщин зонд ввести на глубину 1-1,5см, мужчин – на 3-4см и сделать несколько вращательных движений. У детей материал берут только с наружного отверстия уретры.

ВУЛЬВА, ПРЕДДВЕРИЕ ВЛАГАЛИЩА. Отделяемое берут стерильным ватным тампоном. При воспалении бартолиниевых желез производят их пункцию, при вскрытии абсцесса железы содержимое берут стерильным ватным тампоном.

ВЛАГАЛИЩЕ. Материал для исследования берут стерильным тампоном из заднего свода или с патологически измененных участков слизистой. Материал для посева должен быть взят до проведения мануального исследования.

ЦЕРВИКАЛЬНЫЙ КАНАЛ.

Перед взятием материала необходимо удаление ватным тампоном слизи и обработка шейки матки стерильным физиологическим раствором

Необходимо пользоваться кольпоскопом.

Зонд ввести в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см.

При наличии эрозий цервикального канала необходимо их обработать стерильным физиологическим раствором, и материал следует брать с границы здоровой и измененной ткани.

При извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание стенок влагалища.

Для посева может быть использован соскоб слизистой, полученный при диагностическом выскабливании стенок цервикального канала.

МАТКА Материал берется с помощью специальных инструментов типа шприца-аспиратора, имеющего на зонде покрытие.

При воспалительном процессе в придатках матки материал из очага инфекции (гной, экссудат, кусочки органов) берется либо при оперативном вмешательстве, либо при проведении диагностической пункции в малом тазу, проводимой через влагалищные своды.

Взятый для исследования материал в транспортной среде может сохраняться до 24 часов при +4° С. Не допускается замораживание пробы.

Микробиологическое исследование мочи нужно проводить до начала антибактериальной терапии. Моча здорового человека стерильна.

Утром после тщательного туалета наружных половых органов в стерильную посуду собирают среднюю порцию свободно выпущенной мочи в количестве 3-5 мл. При подозрении на простатит получают 4 пробы: 3 порции мочи (первая и средняя порции при самопроизвольном мочеиспускании и последнюю через 5-10 минут после массажа предстательной железы) и секрет предстательной железы при массаже.

Взятие мочи с помощью катетера связано с риском инфицирования мочевыводящих путей, поэтому его желательно избегать. Катетеризацию производят в случаях, когда больной не способен мочиться или для разграничения воспалительного процесса в почках и мочевом пузыре. С этой целью мочевой пузырь опорожняют и вводят в него 50мл раствора, содержащего 40 мг неомицина и 20 мг полимиксина. Через 10 минут берут пробы мочи для исследования. При локализации процесса в мочевом пузыре моча остается стерильной. При инфицировании почек отмечается бактериурия.

Мочу больного можно получить путем надлобковой пункции мочевого пузыря. Этот метод взятия мочи дает наиболее достоверные результаты.

Микробиологическое исследование мочи надо проводить как можно быстрее после ее получения от больного, т.к. микробы, содержащие в моче, быстро размножаются при комнатной температуре, что может дать ложные результаты при определении степени бактериальной обсемененности. В связи с этим при исследовании мочи на степень бактериурии, от момента взятия пробы мочи до начала исследования в лаборатории должно проходить не более 1-2 часов.

При исследовании мочи на наличие возбудителей урогенитальных инфекций проба может сохраняться до 18 часов при +4° С.

При транспортировке проб мочи необходимо учитывать температуру внешней среды.

КИШЕЧНЫЙ ДИСБАКТЕРИОЗ

Материал (испражнение) на кишечный дисбактериоз забирается до начала лечения антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами.

Пациенту рекомендуется помочиться в унитаз, далее путем естественной дефекации в подкладное судно или ночной горшок собираются испражнения (следить, чтобы не попала моча). Перед сбором материала подкладное судно (ночной горшок) предварительно промываются проточный водой несколько раз, ополаскиваются кипятком.

Испражнения в количестве 1 грамма (из разных мест средней части) из судна (горшка) забирается в стерильный флакон и в течение первых 2 часов доставляется в бактериологическую лабораторию с оформленным направлением. При невозможности быстрой доставки материала в лабораторию, допускается его хранение при +4° С до 6 часов. Не допускается замораживание пробы.