Заболевания

Ведущий путь заражения гепатитом в с и вич

Шпаргалка
Микробиология

24 Классификация антител. Принцип деления антител на классы. Антитела (иммуноглобулины) – это белковые структуры, которые вырабатываюся в ответ на антигены. Иммуноглобулины синтезируются плазаматическими клетками. Состоят из тяжелых и легких полипептидных цепей, соединенных дисульфидными связями. (рис). Последовательность аминокислот в Fc-фрагменте всегда постоянна, а Fab-фрагменте – вариабельна. Паратоп – вариабельный домен Fab-фрагмента. С помощью паратопов иммуног

лобулины реагируют с эпитопами антигенов. По последовательности а/к в Fc-фрагменте различают 5 классов иммуноглобулинов: 1 – IgG – имеет 2 активных центра; отвечает за вторичный иммунный ответ; обладает антимикробным, антитоксическим, опсони-зирующим действием; активирует компле-мент по классическому пути; участвует в кожных аллергических реакциях; может прикрепляться к белкам А и М; проходит через плаценту. 2 – IgM – имеет 10 активных центра, но в реакцию вступает только 5. Об

ладает антимикробным и антитоксическим действием, выражена агглютинация и лизис, отвечает за первичный иммунный ответ, не проходит через плаценту. 3 – IgA – делят на сывороточные и секреторные (sIgA). Секреторный Ig – является димером, в котором находится секреторный компонент. Он придает устойчивость и соединен J-цепью (join). sIgA находятся на всех слизистых оболочках и препятствуют адгезии вируса, осуществляют местный иммунитет. Некоторые бактерии имеют фермент sIgA-протеазу, ко

торый расщепляет IgA. Также IgA усиливает действие лизоцима и комплемента и обладает противовирусным действием. 4 – IgE – участвуют в аллергических реакциях немедленного типа (реагины). Обладают способностью прикрепляться к тучным клеткам и базофилам, на поверхности которых идет образование комплекса АГ+АТ. 5 – IgD – увеличивается количество при кожных заболеваниях. На поверхности В-лимфоцитов находятся IgD и IgM в мономерной форме.

29 Принципы профилактики инфекционной заболеваемости. Вакцины – содержат: убитых микробов, живых ослабленных микробов, отдельные фрагменты микроба (протективный антиген), продукты жизнедеятельности. Вакцины создают активный иммунитет: 1 – Антитоксический – против экзотоксина – вводят анатоксин – обезвреженный экзотоксин, сохранивший антигенные свойства (столбнячный анатоксин). 2 – Антимикробный – против антигенов – вводят убитые микробы (стафилококковая, холер

ная, дизентерийная, гриппозная вакцины), живые ослабленные микробы (БЦЖ, вакцина против холеры, бешенства, гриппа) или фрагменты микробов. Также существуют субклеточные (химические) вакцины – это вакцина против менингита (содержит капсульные полисахариды серотипов А и С), брюшнотифозная вакцина – комбинированная вакцина, кот содержит стобнячный анатоксин и протективные антигены, гриппозная вакцина – содержит антигены Н и N. Комбинированные вакцины – могут сочетать цель

ную бактериальную клетку, фрагменты клеток и анатоксин (брюшнотифозная вакцина, АКДС – адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столб нячная вакцина). Генно-инженерные вакцины (например вакцина против гепатита В). Эубиотики – биопрепараты, которые получают из резидентов человека и используют дляповышения активности иммунитета или при дисбактериозах (колибактерин, бификол, лактобактерии). Сыворотки – содержат готовые антитела и создают пассивный иммунитет: 1 – Для лечения и

профилактики используют антитоксические сыворотки (прготивостолбнячная, против дифтерии, против бруцеллеза). Лошадь дробно гипериммунизируют анатоксином. 2 – Диагностические сыворотки – используют для диагностики: люминисцентная сыворотка для экспресс-метода, гемолитическая сыворотка, агглютинирующая сыворотка, преципитирующая сыворотка.

27 Теории иммуногенеза. Теории: 1 – Теория боковых цепей Эрлиха – клетки органов и тканей имеют на поверхности рецепторы, способные в силу химического сродства связывать антиген. Взамен связанных рецепторов клетка вырабатывает новые рецепторы. Избыток их поступает в кровь и обеспечивает иммунитет к антигену. 2 – Теория фагоцитоза Мечникова. 3 – Инструктивная теория – антитела формируют ся в присутствии антигена, т.е являются матрицей на которой штампуется молекула антитела. 4 – Селекционная

теория Бернета – лимфоидная ткань состоит из огромного числа клонов клеток, специализировавшихся на выработке антител. Попавший антиген вызывает активацию своего клона лимфоцитов, который размножается и начинает вырабатывать специфические антитела. 5 – Генетическая теория Тонегавы — За синтез Fc-фрагмента отвечает С-ген. За синтез вариабельного фрагмента отвечает V-ген (около 200), D-ген (около 80) и J-ген (около 5). В процессе созревания иммунокомпетентных клеток идет рекомбинация этих генов,

поэтому последовательность аминокислот в вариабельном участке будет разная. При синтезе новых иммунокомпетентных клеток в результате рекомбинации появляются Т- и В-лимфоциты с различными комбинациями аминокислот в вариабельном участке. Поэтому при внедрении антигена находится иммунокомпетентная клетка с такой последовательностью аминокислот в вариабельном участке, которая будет специфична к эпитопу данного антигена.

22 Общая характеристика семейства иммуноглобулинов. Антитела (иммуноглобулины) – это белковые структуры, которые вырабатываюся в ответ на антигены. Иммуноглобулины синтезируются плазаматическими клетками. Иммуноглобулиновые рецепторы отвечают за гистосовместимость и расположены на поверхности всех ядерных клеток (МНСI) и на иммунокомпетентных клетках и макрофагах (МНСII). Иммуноглобулины состоят из тяжелых и легких полипептидных цепей, соединенных дисульфид

ными связями. Н-цепь – 450 а/к, L-цепь – 210 а/к. (рис). Последовательность аминокислот в Fc-фрагменте всегда постоянна, а Fab-фрагменте последовательность вариабельна Паратоп – вариабельный домен Fab-фрагмента. С помощью паратопов иммуноглобулины реагируют с эпитопами антигенов. Для иммуноглобулинов характерна: 1 – Специфичность – реагирует со строго специфичным антигеном: специфичность обусловлена паратопом. 2 – Гетерогенность – иммуноглобулины могут реагировать с разными антиге

нами если они имеют сходные точки приложения. Моноклональные антитела – строго специфичны, лишены гетерогенности. Гипервареабельный участок является антигеном для самого хозяина и называется идиотпом. Вся молекула иммуноглобулина является антигеном для организма другого вида. По последовательности а/к в Fc-фрагменте различают 5 классов иммуноглобулинов (G, A, M, E, D).

21 Центральные и периферические органы иммунной системы человека. Иммунитет – состояние организма после попадания в него антигена, проявляющееся синтезом антител, сенсибилизированных лимфоцитов и поддерживающее постоянство гомеостаза. За все это отвечает иммунная система: 1 – Центральные иммунные органы: тимус и костный мозг. 2 – Периферические иммунные органы: лимфатические узлы, окологлоточное кольцо, аппендикс, пейеровы бляшки, солитарные фолликулы.

25 Схема формирования иммунной реакции организма. Макрофаг фагоцитирует антиген, происходит процессинг анигена в иммуногенное состояние. Макрофаг выставляет на поверхность МНСII+эпитоп и выделяет цитокины (ФНО, g-интерферон, ИЛ1, ИЛ6).РецепторыТ-предшеств енника узнают ИЛ1 и МНСII+эпитоп на поверхности макрофага (механизм двойного распознавания). После этого предшественни станет либо Т-хелпером, либо Т-киллером. У Т-хелпера есть есть 2 субпопуляции (Тх1 и Тх2). ИЛ10 по

давляет ТХ1, который отвечает за клеточный иммунитет, включается Тх2, который активизирует гуморальный иммунитет. Т-хелпер выделяет ИЛ2, который активизирует Тх2 и самого себя. В очаг воспаления кроме Т-лимфоцитов приходят B-лифоциты, поверхность которых покрыта иммуноглобулинами М в мономерной форме. Антиген может находиться в свободном состоянии и тогда он взаимодействует с тем В-лимфоцитом у которого антитело специфично. Также антиген может быть преподнесен В-лимфоциту ден

дритной клеткой. Происходит процессинг и В-лимфоцит выставляет на поверхность МНСII+эпитоп. В-лимфоциты начинают размножаться и под дейстием цитокинов превращаются в плазматические клетки. ИЛ4 активизирует плазмоциты на синтез IgE; ИЛ5, ИЛ10 – на синтез IgА; ИЛ5 – на синтез IgG. IgG – отвечают за вторичный иммунный ответ, IgM – за первичный иммунный ответ.

4 Общая характеристика группы резидентов человека. Резиденты, заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. Из факторов симбиоза резиденты имеют фактор инфективности и фактор токсичности. Каждая ниша обладает своими анатомо-физиологическими особенностями, поэтому в каждом биотопе находятся разные асоциации микробов. Состав ассоциации зависит от взаимоотношениями между микробами. Абсолютное количество микробов регулируется

макроорганизмом с помощью местных факторов резистентности (неспецифические факторы) и иммунными механизмами. Резиденты могут быть: 1 – постоянными. 2 – транзиторными (временное нахождение микробов из внешней среды). 3 – бактерионосительство. Положительная роль резидентной флоры: 1 – Формирование иммунитета – резиденты дают антигенный стимул иммунокомпетентным клеткам, и на их поверхности появляются рецепторы к этим антигенам. 2 – Резиденты являются антагонистами по отношению к

другим микробам и патогенам, являясь биологическим барьером по принципу экологической ниши. 3 – Резиденты участвуют в метаболизме макроорганизма, синтезируя витамины и ферментируя пищевой субстрат.

13 Определение понятия “инфекционный процесс”, формы инфекционного процесса и условия их формирования. Инфекционный процесс возникает при проникновении микроорганизма в макроорганизм и его размножении в нем. Инфекционный процесс, в зависимости от вирулентности микроорганизма и формы его взаимодействия с макроорганизмом, может иметь различные проявления – от бессимптомного носительства до тяжелых форм инфекционного заболевания. Инфекционная болезнь является

наиболее выраженной формой инфекционного процесса и для нее характерно наличие определенного возбудителя, инкубационного периода, специфичных симптомов и иммунного ответа. Инфекционные болезни вызываются патогенами – это микроорганизмы, которые обладают всеми тремя факторами симбиоза: инфективность (занимает определенную нишу), инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов агрессии проникает в глубь тканей; токсичность (нанесение вреда экзо- или эндотоксинами).

Патогенность – это потенциальная способность микроба нанести вред макроорганизму. Патогенностью обладают патогены, резиденты и гетеробионты.

19 Характеристика понятия “антиген”, общие свойства антигена. Антигены – это вещества, которые при попадании в организм, вызывают механизмы противодействия, проявляющиеся в виде синтеза антител и сенсибилизированных Т- и В-лимфоцитов. Иммуногенность – это способность антигена вызывать синтез особых протективных (защитных) антител и создавать иммунологическую память. Общие св-ва антигенов: 1 – Макромолекулярность (высокий молекулярный вес). 2 – Стабильность пространственной

конфигурации, т.к антитела узнают эту конфигурацию. 3 – Специфичность, которая обусловлена эпитопами (детерминантными группами) – последовательность аминокислот у белков, конечные участки полисахаридов. 4 – Чужеродность (свои клетки тоже в силу каких-то причин могут стать чужеродными). 5 – Способ попадания – в основном парентеральным путем (минуя ЖКТ), за исключением пищевых аллергенов, которые под действием ферментов ЖКТ не расщепляются. 6 – Антиген должен участвовать в

метаболизме клеток хозяина, т.к на месте этого воздействия возникает воспаление.

23 Химический состав и структура антител.. Антитела (иммуноглобулины) – это белковые структуры, которые вырабатываюся в ответ на антигены. Иммуноглобулины синтезируются плазаматическими клетками. Состоят из тяжелых и легких полипептидных цепей, соединенных дисульфидными связями. Н-цепь – 450 а/к, L-цепь – 210 а/к. (рис). Последовательность аминокислот в Fc-фрагменте всегда постоянна, а Fab-фрагменте последовательность вариабельна Паратоп – вариабельный домен Fab-фрагмента. С по

мощью паратопов иммуноглобулины реагируют с эпитопами антигенов. Для иммуноглобулинов характерна: 1 – Специфичность – реагирует со строго специфичным антигеном: специфичность обусловлена паратопом. 2 – Гетерогенность – иммуноглобулины могут реагировать с разными антигенами если они имеют сходные точки приложения. Моноклональные антитела – строго специфичны, лишены гетерогенности. Гипервареабельный участок является антигеном для самого хозяина и называется идиотпом. Вся

молекула иммуноглобулина является антигеном для организма другого вида. По последовательности а/к в Fc-фрагменте различают 5 классов иммуноглобулинов (G, A, M, E, D).

1 Определение понятия “симбиоз”, этапы симбиоза микробов с организмом. Симбиоз – это взаимосвязанный метаболизм различных систем. Возникает между бактериями и макроорганизмами. Этапы симбиоза: 1 – Инфективность – микроб попадает в экологическую нишу, происходит адгезия и при благоприятных условиях колонизируется. Микроб прикрепляется за счет капсулы, пилей, лектиноподобных структур клеточной стенки, ферментов с помощью которых образуются липкие полимеры. Микроб находится

под контролем макроорганизма. 2 – Инвазивность (проникновение) – микроб выходит из под контроля макроорганизма и с помощью ферментов, которые разрушают ткани макроорганизма, проникает в глубь тканей. 3 – Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки). Токсинемия – всасывание токсина в кровь.

2 Факторы симбиоза. Классификация бактерий в зависимости от наличия у них факторов симбиоза. Симбиоз – это взаимосвязанный метаболизм различных систем. Возникает между бактериями и макроорганизмами. Факторы симбиоза: 1 – Инфективность – микроб попадает в экологическую нишу, происходит адгезия и при благоприятных условиях колонизируется. 2 – Инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов проникает в глубь тканей. 3 – Токсичность – нанесение вреда токсинами. Мик

роб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки). Классификация: 1 – Гетеробионты – микробы, которые находятся в окружающей среде; имеют третий фактор (фактор токсичности). 2 – Резиденты – заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. У них есть фактор инфективности и фактор токсичности. 3 – Патогены – имеют все три фактора (инфективности,

5 Факторы симбиоза у резидентов, закономерности формирования резидентной микробной флоры у человека. Резиденты, заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. Из факторов симбиоза резиденты имеют фактор инфективности и фактор токсичности. Инфективность – микроб попадает в экологическую нишу, происходит адгезия и при благоприятных условиях колонизируется. Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при

жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки). Каждая ниша обладает своими анатомо-физиологическими особенностями, поэтому в каждом биотопе находятся разные асоциации микробов. Состав ассоциации зависит от взаимоотношениями между микробами. Абсолютное количество микробов регулируется макроорганизмом с помощью местных факторов резистентности (неспецифические факторы) и иммунными механизмами.

15 Характеристика механизмов неспецифической резистентности человека. 1 – Механизмы непринятия – “видовой” иммунитет (например люди не болеют собачьей чумкой). При определенных экстремальных условиях видовой иммунитет можно преодолеть. 2 – Механизмы противодействия: а – механические факторы (целостность кожных покровов; жирные кислоты, сальные и потовые железы, обладающие бактерицидным действием; лизоцим слизистых оболочек – разрушает гликозидные связи пептидоглика

на в гр+ бактериях), б – химические факторы – HCl желудочного сока, желчные кислоты (резиденты ЖКТ к ним адаптированы), пищеварительные ферменты, в – гуморальные факторы: система комплемента, противовирусные факторы (интерферон a, b; ингибиторы a, b, g), плакины, b-лизины, фибронектин, г – клеточныефакторы:резидент ная микрофлора (является биологическим барьером ко всем микробам, которые не входят в их экологическую нишу), фагоцитоз (поглощение чужеродных частиц и их переваривание).

28 Механизмы протективной активности антител. 1 – Нейтрализация экзотоксина антитоксином. Молекула экзотоксина состоит из двух фракций: А (токсин) и В (носитель и рецептор). Клетка поглощает экзотоксин, образуя вакуоль. Ферменты клетки расщепляют экзотоксин на фракции А и В ® клетка погибает. Антитоксин взаимодействует с В-фракцией и экзотоксин теряет способность попасть в клетку, т.к рецептор закрыт. Анатоксин – обезвреженный экзотоксин (без фракции А). 2 – Нейтрализация адгезивных

свойств микроба – за счет секреторного IgA, который находится на поверхноти слизистых оболочек. 3 – Антитела нейтрализуют факторы агрессии. 4 – Антитела реагируют с микробом. Взаимодействуя со структурами клеточной стенки бактерий, антитела блокируют поступление питательных веществ. 5 – Опсонины – усиливают фагоцитоз. 6 – Лизис бактерий – если на микроб сядет IgG, изменится конформация ® освобождается углеводная часть гликопротеида ® идет активация на мембранеиобразуется МАК, который осу

ществляет лизис бактерии.

7 Определение понятий “дисбактериоз” и “оппортунистическая болезнь” и механизм развития этих процессов. Резиденты, заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. Каждая ниша обладает своими анатомо-физиологическими особенностями, поэтому в каждом биотопе находятся разные асоциации микробов. Состав ассоциации зависит от взаимоотношениями между микробами. Нарушение количественного и качественного состава в определенной ниши называется

дисбактериозом. Заболевания, которые вызываются резидентами называются оппортунистическими. Резиденты могут вызвать заболевание при: 1 – Снижении местных факторов защиты. 2 – Искусственном нарушении состава резидентной микрофлоры (антибиотикотерапия). 3 – Снятии репрессии с генов, отвечающих за инвазионные свойства. Т.е у резидента появляется фактор инвазивности и он становится патогеном.

8 Определение понятия “патоген” и общая характеристика этой группы бактерий. Патогены – это микроорганизмы, которые обладают всеми тремя факторами симбиоза: 1 – Инфективность – микроб попадает в экологическую нишу, происходит адгезия и при благоприятных условиях колонизируется. 2 – Инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов агрессии проникает в глубь тканей. Ферменты агрессии патогенов: гиалуронидаза, фибринолизин, коллагеназа, лецитиназа (расщепляет лецитин,

кот входит в мембраны), нейроминидаза (отщипляет сиаловые кислоты от мукополисахарида), ДНКаза, плазмокоагулаза. 3 – Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактериальной клетки). Заболевания, которые вызывают патогены называются инфекционными.

12 Сравнительная характристика экзо- и эндотоксинов. 1 – Экзотоксины выделяются в процессе жизнедеятельности грам+ бактерий (стрептококк, пневмококк, стафилококк, бациллы, клостридии). Эндотоксин вырабатывается после гибели бактериальной клетки. Холерный вибрион вырабатывает экзотоксин, а после гибели холерного вибриона выделяется эндотоксин. 2 – По химическому составу экзотоксин – это белок, эндотоксин – липополисахарид клеточной стенки (липид А). 3 – При поражении экзотоксином клини

ка зависит от пораженной ткани, а при поражении эндотоксином клиника схожа (/t, \ АД). 4 – У экзотоксина выражены антигенные свойства, эндотоксин – слабый антиген. 5 – Экзотоксин хорошо нейтрализуется антитоксической сывороткой, эндотоксин – плохо. 6 – Экзотоксин используется для получения анатоксина (обезвреженный экзотоксин, сохранивший антигенные свойства).

17 Классификация фагоцитов человека. Стадии фагоцитоза. Характеристика понятий “завершенный” и “не завершенный” фагоцитоз. Фагоцитоз – поглощение чужеродных частиц любой природы и их переваривание. Фагоцитами являются: микрофаги – гранулоциты (нейтрофилы) и макрофаги (моноциты, клетки ретикуло-эндотелиальной системы). Стадии фагоцитоза: 1 – Хемотаксис (в очаг воспаления приходят лейкоциты). 2 – Адсорбция и захват. 3 – Образование фагосомы (соединяется с лизо

сомами и образуется фаголизосома). 4 – Переваривание: кислородзависимое (за счет перекиси водорода) и кислороднезависимое (за счет катионных белков (лактоферин) и лизоцима). Завершенный фагоцитоз – когда микроб переваривается в фагоците, незавершенный фагоцитоз – когда микроб не переваривается, а размножается и в подвижных фагоцитах распространяется по организму. Это происходит из-за структур клеточной стенки бактерий.

18 Общая характеристика системы комплемента. 1 – система комплемента – это группа из 26 сывороточных белков. Их функция – контроль воспаления. Синтезируются в эпителии кишечника, печени, макрофагах, лимфоцитах, селезенке. 2 – При отсутствии внешнего активатора комплемент находится в неактивном состоянии. 3 – активация комплемента происходит классическим путем (в результате образования комплекса АГ+АТ), альтернативным путем (без участия антител), лектиновым (за счет маннозных

структур бактерий). 4 – активация комплемента происходит в строго определенной последовательности, либо путем расщепления неактивных компонентов, либо путем соединения неактивных компонентов с образованием активных. 5 – антимикробная активность заключается в лизисе бактерий или в активации фагоцитов. 6 – участие в анафилактических реакциях за счет образования анафилотоксина. 7 – регуляция иммунного ответа. 8 – участие в аутоиммунных процессах.

1 Определение понятия “симбиоз”, этапы симбиоза микробов с организмом

2 Факторы симбиоза. Классификация бактерий в зависимости от наличия у них факторов симбиоза

3 Характеристика гетеробионтов и их роль в инфекционной заболеваемости людей

4 Общая характеристика группы резидентов человека

5 Факторы симбиоза у резидентов, закономерности формирования резидентной микробной флоры у человека

6 Роль резидентов в инфекционной заболеваемости человека

7 Определение понятий “дисбактериоз” и “оппортунистическая болезнь” и механизм развития этих процессов

8 Определение понятия “патоген” и общая характеристика этой группы бактерий.

9 Сравнительная характеристика понятий “патоген” и “патогенность”

10 Сравнительная характеристика понятий “патогенность” и “вирулентность”.

11 Характеристика факторов вирулентности микробов

12 Сравнительная характристика экзо- и эндотоксинов

13 Определение понятия “инфекционный процесс”, формы инфекционного процесса и условия их формирования

14 Сравнительная характеристика оппортунистической и инфекционной болезни

15 Характеристика механизмов неспецифической резистентности человека

16 Клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности

17 Классификация фагоцитов человека. Стадии фагоцитоза. Характеристика понятий “завершенный” и “не завершенный” фагоцитоз

18 Общая характеристика системы комплемента

19 Характеристика понятия “антиген”, общие свойства антигена

20 Характеристика бактериальных антигенов

21 Центральные и периферические органы иммунной системы человека

22 Общая характеристика семейства иммуноглобулинов

23 Химический состав и структура антител

24 Классификация антител. Принцип деления антител на классы

25 Схема формирования иммунной реакции организма

26 Механизм антигеннезависимого формирования специфичности Т- и В-лимфоцитарных систем

27 Теории иммуногенеза

28 Механизмы протективной активности антител

29 Принципы профилактики инфекционной заболеваемости

3 Характеристика гетеробионтов и их роль в инфекционной заболеваемости людей. Гетеробионты – микробы, которые находятся в окружающей среде. Из факторов симбиоза гетеробионты имеют только третий фактор (фактор токсичности). Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А – липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки). Гетеробионт может нанести вред макроорганизму при: 1 –

Ослаблении местных и общих факторов защиты. 2 – Попадании гетеробионтов в макроорганизм необычным путем из окружающей среды. 3 – Попадании гетеробионтов в большом количестве. Гетеробионты вызывают заболевания – токсикозы.

14 Сравнительная характеристика оппортунистической и инфекционной болезни. 1 – Инфекционная болезнь вызывается патогенами (обладают всеми тремя факторами симбиоза: инфективность, инвазивность, токсичность); оппортунистическая болезнь вызывается резидентами при ослаблении местных факторов защиты. 2 – Для инфекционных болезней характерна высокая контагиозность (заразительность); для оппортунистических – нет.. 3 – Для Для инфекционных болезней характерен инкубационный

период, для оппортунистических – нет. 4 – Клиника инфекционных болезней зависит от особенностей микроба, а при оппортунистических болезнях – от местных факторов резистентности. 5 – При инфекционных болезнях сила имунного ответа высокая, при оппортунистических болезнях иммунный ответ слабый.

16 Клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности. Гуморальные факторы: система комплемента, противовирусные факторы (интерферон a, b, ингибиторы a, b, g),плакины,b-лизины, фибронектин. Клеточные факторы: 1 – Резидентная микрофлора – является биологическим барьером ко всем микробам, которые не входят в их экологическую нишу. Также существует микробный антагонизм: перекись водорода, колибактерин, коллецины (антибиотикоподобные вещества), бактериальный ли

зоцим (стафилококк), кислоты (в кишечнике гнилостные бактерии). 2 – Фагоцитоз – поглощение чужеродных частиц любой природы и их переваривание. Фагоцитами являются нейтрофилы и макрофаги (моноциты, клетки ретикуло-эндотелиальной системы).

6 Роль резидентов в инфекционной заболеваемости человека. Резиденты, заняв в макроорганизме определенные ниши, составляют нормальную резидентную флору. Из факторов симбиоза резиденты имеют фактор инфективности и фактор токсичности. Резиденты могут нанести вред макроорганизму при: 1 – Снижении местных факторов защиты. 2 – Искусственном нарушении состава резидентной микрофлоры (антибиотикотерапия). 3 – Снятии репрессии с генов, отвечающих за инвазионные свойства. Т.е у

резидента появляется фактор инвазивности и он становится патогеном.

9 Сравнительная характеристика понятий “патоген” и “патогенность”. Патогены – это микроорганизмы, которые обладают всеми тремя факторами симбиоза: инфективность (занимает определенную нишу), инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов агрессии проникает в глубь тканей; токсичность (нанесение вреда экзо- или эндотоксинами). Патогенность – это потенциальная способность микроба нанести вред макроорганизму. Патогенностью обладают патогены, резиденты и гетеробионты.

11 Характеристика факторов вирулентности микробов. Патогенность – это потенциальная способность микроба нанести вред макроорганизму. Вирулентность – это мера патогенности, степень болезнетворности микробов, обусловленная набором факторов инвазивности и токсичности. Инвазивность (проникновение) – микроб с помощью ферментов агрессии проникает в глубь тканей. Токсичность – нанесение вреда токсинами. Микроб может выделять экзотоксин (при жизнедеятельности) и эндотоксин (липид А –

липополисахарид клеточной стенки; вырабатывается после гибели бактриальной клетки).

10 Сравнительная характеристика понятий “патогенность” и “вирулентность”. Патогенность – это потенциальная способность микроба нанести вред макроорганизму. Патогенностью обладают патогены, резиденты и гетеробионты. Вирулентность – это мера патогенности, степень болезнетворности микробов, обусловленная набором факторов инвазивности и токсичности.

20 Характеристика бактериальных антигенов. Антигены – это вещества, которые при попадании в организм, вызывают механизмы противодействия, проявляющиеся в виде синтеза антител и сенсибилизированных Т- и В-лимфоцитов. Антигены бактериальной клетки: 1 – Поверхностно расположенные антигены: жгутики, пили, капсула, клеточная стенка. 2 – Антигены, находящиеся внутри клетки и освобождающиеся после ее гибели: эндотоксин, липополисахарид. 3 – Антигены, выделяющиеся при жизнедея

тельности бактерий: экзотоксин, ферменты. Антигены Гр+ стенки: тейхоевые кислоты, пептидогликаны, белки. Антигены Гр- стенки: О-антиген (соматический антиген – это глюцидолипидополипептидны й комплекс), Н-антиген (жгутиковый белковый антиген).

26 Механизм антигеннезависимого формирования специфичности Т- и В-лимфоцитарных систем.Молекулаиммуноглоб улина состоит из константной части и вариабельной части. За синтез Fc-фрагмента отвечает С-ген. За синтез вариабельного фрагмента отвечает V-ген (около 200), D-ген (около 80) и J-ген (около 5). В процессе созревания иммунокомпетентных клеток идет рекомбинация этих генов, поэтому последовательность аминокислот в вариабельном участке будет разная. При синтезе новых имму

нокомпетентных клеток в результате рекомбинации появляются Т- и В-лимфоциты с различными комбинациями аминокислот в вариабельном участке. Поэтому при внедрении антигена находится иммунокомпетентная клетка с такой последовательностью аминокислот в вариабельном участке, которая будет специфична к эпитопу данного антигена.

4 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Туберкулеза. Микроскопический метод – исследуемый материал: мокрота, моча, спиномозговая жидкость. При окраске мазков мето­дом по Цилю-Нильсену туберкулёзные палочки окрашивают­ся в ярко-красный цвет, располагаются поодиночке или не­большими скоплениями. Микроскопическое исследование является ориентиро­вочным и позволяет судить лишь о наличие кислотоустойчи­вых бактерий в материале без определения их родовой

принадлежности. Бактериологическое исследование. Особенности метода: 1 – Для освобождения от сопутствующей микрофлоры ис­следуемый материал обрабатывают 10% серной ки­слотой или 4-6% раствором едкого натра, центрифу­гируют. Кислоту нейтрализуют, а материал засевают внесколько пробирок со средой Левенштейна-Иенсена или другими специальными средами. 2 – Посевы инкубируют при 37° С 4-6 недель и более, так как туберкулёзная палочка размножается очень мед­ленно. Рост М. tuberculosis на сре

Смотрите так же:  Вместо антибиотиков при простуде

де имеет вид сероватого или светло-кремового, морщинистого или крошкообразного сухо­го налёта. 3 – При иддентификации культуры чаще всего определя­ют способность выделенной культуры синтезировать никотиновую кислоту – неациновая проба Конно, с помощью которой удаётся отличить М, tuberculosis, хорошо синтезирующие никотиновую кислоту, от па­лочек М. bovis, образующих её вминимальныхколи­чествах. 4 – Выявление корд-фактора. Для ускоренной диагностики туберкулёза используют, метод

микрокультур Прайса. Для этого на нескольких предметных стёклах делают толстые мазки из иссле­дуемого материала. Мазки обрабатывают 2-6% серной кислотой и нейтрализуют щёлочью, после этого их помещают во флаконы с гемолизированной цитратной кровью. Через 7-14 дней мазки окрашивают по Цилю-Нильсену и микроскопируют – вирулентные штаммы образуют микрокультуры, имеющие вид жгутов или кос (корд-фактор). 5 – Определение чувствительности к антибиотикам и химиотерапевтическим

препаратам проводят методом серийных разведений. Биологический метод (когда не ясна клиника). Применяется с целью выделения чистой культуры возбудителя туберкулёза из органов животного, заражённого исследуемым материалом, а также для определения вирулент­ности этих микобактерий. Серодиагностика. Используют в качестве дополнительного теста РСК и РИГА.. Положительные результаты отмечаются при активном туберкулёзе, а также при инфицировании туберкулёза и вак­цинации. Кожно-

аллергическая проба.. Ставится с туберкулином – очищенной белковой фракцией (ППД=РРД), полученной из микобактерий туберкулёза, для ха­рактеристики, оценки течения туберкулёзного процесса, оп­ределения эффективности вакцинации и отбора контингентов для ревакцинации против туберкулёза. Туберкулин вводят внутрикожно в строго определённой дозировке (реакция Ман­ту). Специфическая профилактика осуществляется вакциной БЦЖ (авирулентный живой микроб M. Bovis вводится на первой недели

жизни). Ревакцинацию проводят в 7 лет и далее с интервалом в 5 лет до 30 летнего возраста при отрицательных туберкулиновых пробах.

28 Возбудители гриппа, методы лабораторной диагностики. Антигеннаяизменчивостьвиp yca. Специфическая профилактика гриппа. Возбудители – вирусы гриппа, РНК – геномные, родов А, В и С. Антигенные свойства вируса гриппа А. У вирусов гриппа известно несколько антигенов: один антиген это S-антиген, он связан с рибонуклеопротеидом, то есть внутренний антиген. По S-антигену вирусы гриппа легко разделяются на вирусы гриппа А, гриппа В, гриппа С. Антигенный перекресток тут не

возможен, так как имеется строгая антигенная специфичность. Поверхностные антигены: гемагглютинин и нейраминидаза. Известны следующие типы вируса гриппа: 1.вирус гриппа А с антигенами Н0N1. 2. Вирус гриппа А с антигенами H1N1. 3. H2N2 4. H3N2. Изменчивость вируса гриппа А. Изменчивость вируса гриппа обусловлена двумя генетическими процессами: 1. Генетический шифт возникает в результате полной смены гена и обусловлен обменом генов при одновременной репродукции в клетке двух

вирусов гриппа 2.антигенный дрейф – изменение антигенного состава, без полной замены антигена. Внутри антигена происходят небольшие изменения. В основе антигенного дрейфа лежат точечные мутации гена, а как следствие изменения антигена. Иммунитет при гриппе напряженный, типоспецифический. Лабораторная диагностика. Существует три основных метода: 1.Экспресс диагностика: иммунофлюресцентный метод, ИФА. Метод иммунофлюоресценции: больному в носовой ход вводится шлифованное стекло и

делается легкий соскоб. Потом стекла обрабатывают люминесцирующими сыворотками и если в клетке есть вирусный антиген, антитела буду с ним реагировать и мы увидит свечение. 2.Вирусологический. Берут смыв из носоглотки больного, заражают куриный эмбрион, после инкубации проверяют наличие вируса по реакции гемагглютинации – вирус гриппа склеивает эритроциты за счеч наличия поверхностного гемагглютинина. 3.Сероидентификация вируса гриппа осуществляется с помощью реакции торможения

гемагглютинации (РТГА). К вирусу добавляют типоспецифическую сыворотку (а/т), а затем эритроциты. Специфическая профилактика. Для профилактики гриппа ис­пользуют ремантадин, который подавляет репродукцию вируса грип­па типа А. Для пассивной профилактики применяют противогрип­позный иммуноглобулин человека, полученный из сыворотки крови доноров, иммунизированных гриппозной вакциной. Для вакцино-профилактики используют живые и инактивированные вакцины. При введении

живых вакцин формируется как общий, так и местный иммунитет. В настоящее время получены инактивированные вакцины различ­ных типов: вирионные, субъединичные, расщепленные и смешанные. Вирионные вакцины получают путем высококачественной очистки вирусов, выращенных в куриных эмбрионах. Субъединичные вакци­ны представляют собой очищенные поверхностные антигены вируса гриппа — гемагглютинины и нейраминидазу. Расщепленные вакцины получают из очищенной суспензии вирионов

путем обработки детер­гентами.

29 Возбудителтг гепатита, методы лабораторной диагностики и специфической про­филактики гепатита. Гепатиты — это воспалительные поражения печени, вызванные различными этиологическими факторами. Гепатиты могут быть неинфекционные: лекарственные (при использовании некоторых антибиотиков) и токсические (при употреблении алкоголя, ядовитых шляпочных грибов). Инфекционные гепатиты могут быть вызваны различными группами микроорганизмов — простейшими (токсоплазмы),

бактериями (лептоспиры, иерсинии), вирусами (вирус Эпштейна-Бара, цитомегаловирус). К возбудителям вирусных гепатитов относятся также вирусы гепатита А,В,С,Д.Е,F. У вирусов гепатита А,В,С,Д,Е,F единственной мишенью в организме являются гепатоциты, поэтому данные возбудители относятся к первичным возбудителям вирусных гепатитов. Вирус гепатита А (НА V ). Диагностика. Включает в себя серодиагностику – определение иммуноглобулинов класса М в ИФА, поиск вирусных антигенов в крови с помо

щью ИФА, используют ДНК-зонды, иммуно-электронную микроскопию (ИЭМ) — можно увидеть вирус (дорогие методы). При подозрении на гепатит А ставят биохимические тесты, определяя активность ферментов АлАТ, АсАТ, количество билирубина. Профилактика. Для специфической профилактики — инактивированная убитая вакцина из вируса гепатита А. Иммунизации подвергаются дети, медперсонал. Вирус гепатита Е (HEV) сходен с вирусом гепатита А. Специфическая профилактика не разработана. Ди

агностика — применяется иммуно-электронная микроскопия, можно определить в сыворотке антигены с помощью иммуно-ферментного анализа. Вирус гепатита В (HBV). Профилактика. Специфическая – генноинжинерная вакцина (дрожжевая) получают путем пересадки гена, отвечающего за продукцию Hbs Ag в клетке дрожжей. С помощью этой вакцины иммунизируют детей родившихся от матерей страдающих гепатитом В, медработникам. Диагностика. Заключается в обнаружении Hbs Hbc Hbe Ag c

помощью иммуноферментного анализа и в обнаружении антител — антиНвс и антиНве иммуноглобулины. Гепатит Д. (HDV). Диагностика. Возможна по антигенам и антителам с помощью ИФА. Гепатит С (НС V ). Диагностика. Сводится к определению антител. Из всех видов гепатитов, только гепатит А дает устойчивый иммунитет, так что можно переболеть несколькими гепатитами (А+В,В+Д и даже А+В+Д, а потом С).

2 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Дифтерии. Основной метод диагностики – бактериологический. Материал засевают на элективные кровяно-теллуритовые среды (среда Клауберга), где подавляется рост сопутствующей флоры. На теллуритовой среде C..diphtheriae образует черные колонии засчетвосстановления теллурита. Колонии пересевают на кровяной агар для получения чистой культуры. Для подтверждения диагноза дифтерии в первую очередь необходимо установить ток

сигенность выделенной культуры (способность к продукции дифтерийного токсина) с помощью различных серологических реакций. Оп­ределение токсигенности – реакция преципитации в агаре с антитоксической противодифтерийной сывороткой: в чашку Петри с агаром, содержащим лошадиную сыворотку, мальтозу и цистин, кладут полоску фильтровальной бумаги, пропитанную анти­токсической противодифтерийной сывороткой. Затем засевают исследуемые культуры в виде перпендикулярных к бумаге штри

хов. В качестве контроля используют заведомо токсигенную куль­туру. Посевы инкубируют при 37 «С до следующего дня. При размножении токсигенной культуры в месте соединения ток­сина с антитоксическими антителами образуется преципитат в виде белых линий — «усов». Выделенную культуру идентифицируют и дифференцируют по морфоло­гическим особенностям, культуральным и биохимическим признакам: пробы на цистиназу, уреазу, ферментация углево­дов и др. Для определения цистиназы (проба Пизу) в

столбик питательного агара с цистином уколом засевают исследуемую культуру. C.diphtheriae вызывают почернение среды по ходу посева (в ре­зультате образования сульфида свинца). Для определения уреазы (проба Закса) готовят спирто­вой раствор мочевины и раствор индикатора — фенолового красного, затем исследуемые бактерии петлей вносят и растирают по стенке пробирки. После 20—30-минутной инкубации при 37 °С наблюдают расщепление мочевины уреазой, в результате чего среда при

обретает красный цвет. Профилактика: Получение дифтерийного анатоксина:кэкзотоксину добовляют формалин, и ставят в термостат при t – 40 на 3-4 недели. За это время фермент А разрушается, токсические св-ва исчезают, а антигенные св-ва сохраняются. Антитела вырабатываются к фракции В, и попавшая молекула экзотоксина прикрепиться не может, и выводится через почки. Активная профилактика: вакцины: дифтерийный анатоксин, АКДС, АДС, АКДС+полимиелит. Пассивная профилак

тика – не вакцинированным детям вводят противодифтерийную анатоксическую сыворотку, примерно 5000МЕ. При тяжел формах дифтерии используют анатоксическую противодифтерийную сыворотку по Безредко, примерно 100000МЕ. Получение антитоксической сыворотки – иммунизируют лошадь дифтерийным анатоксином.

1 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Дифтерии. Факторы вирулентности. Возбудителем явл коринебактерия. Морфолог св-ва: палочка, на концах имеет утолщения – волютин (по хим составу явл полифосфатами). В чистой культуре располагается под углом. Гр+ , красят ее уксусно-кислой синькой, либо по Нейсеру. Имеет микрокапсулу, и в клеточной стенке факторы адгезии. Культивирование: требовательная, растет на средах с добавлением сыворотки: среда Ру (свернутая лоша

диная сыворотка), среда Леффлера (три части свернутой сыворотки и одна часть сахарного бульона). Эти сыворотки используют для получения чистых культур. Первичный посев делают на кровяно-теллуритовые среды (среда Клауберга), где подавляется рост сопутствующей флоры. На этих средах различают три биовара: 1 – gravis (R-формы, серые с шероховатыми краями), 2 – mitis (S-форма, гладкие, блестящие, с ровными краями, черного цвета), 3 – intermedius. Резиденты – ложнаядифтерийнаяпалочка (палочка Гоффмана),

обитает на слизистых полости рта. Палочка Xerosis – обитает на слизистой носа. Ложные палочки на этих средах будут коричневого цвета. Биохимическая активность: наряду с другими ферментами возбудитель дифтерии обладает цистиназой и уреазой. Gravis ферментирует крахмал и гликоген в отличие от mitis. Факторы вирулентности: фактор адгезии клеточной стенки, корд-фактор, фактор инвазивности – гиалуронидаза, экзотоксин – действием которого обьясняется патогенез заболевания.

3 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Туберкулеза. Факторы вирулентности. Источник инфекции – больной человек. Морфологические свойства: тонкая, изящная, слегка изогнутая, гр+. Из–за высокого содержания липидов окрашивается по Цилю-Нильсену (красный цвет). Имеет кислотоустойчивые участки (зерна Муха). Под действием лек препаратов превращается в: L формы, фильтрующиеся формы (проходит через бактериальные фильтры), ветвящиеся формы. Куль

туральные св-ва: размножается медленно, требовательная (глицерин, желток, картофельная мука, аспарагиновые кислоты и др). Культивируют ее на среде Левенштейн-Йенсена (желток, картофельная мука, аспарагиновая кислота, малахитовая зелень для подавления сопутствующей микрофлоры). Растет 3-4 недели. Биохимические свойства: микобактрии туберкулеза дают положительный результат при ниациновом тесте, редуцируют нитраты, разлагают мочевину, никотинамид, пиразинамид. Факторы вирулентности: к

пептидогликану через фосфарные остатки присоединяется вещ-во ЛАМ (липидоарабиноманозный комплекс). Маноза на верхушке ЛАМ дает сродство к макрофагам. Имеется корд-фактор в состав которого входят миколиевые кислоты.. Этот фактор имеется только у вирулентных форм. В кл стенке нах-ся белковые молекулы – туберкулопротеины. Также имеются гликолипиды, которые придают устойчивость во внешней среде. Сульфолипиды – нарушают переваривание туберкулезной палочки в фагосоме (незавершенный

8 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных заболеваний. Для большинства кишечных инфекций ведущим методом диагностики является бактериологический. Исследуемый материал (фекалии) засевают на дифференциально диагностическую среду (Эндо) и ставят в термостат. Через сутки выросли 2 типа колоний: 1 – Lac+ — гладкие, малинового цвета сметаллическимотливом, круглой формы Е.Соli. 2 – Lac- — бесцветные колонии (патогенные микробы). Из колонии

Lac-: 1 – приготовлен мазок, окрашен по грамму. При микроскопии – Гр- палочки. 2 – Определение подвижности методом “висячей капли”. 3 – Получение чистой культуры (среда Ресселя). Для определения родовой принадлежности Гр- палочек ставят реакцию аггютинации на стекле с поливалентными агглютинирующими сыво-ротками (сальмонеллезными, эшерихиоз-ными, дизентерийными). Допустим реакция положительна с сальмонеллезной сыворот-кой Þ Гр- палочка относится к роду Salmo

nella. Исследуемую сальмонеллу пересевают на среду Ресселя для выделения чистой культуры. Идентификация сальмонелл: 1 – Посев на среды Api или Enterotest или Enterotube для определения б/х активности. 2 – Для более точного определения вида сальмонелл ставят реакцию агглютинации на стекле с сальмонелезными сыворотками. Профилактика: проведение санитарно-гигиенических мероприятий, заключающихся, в частности, в правильной обработке мяса и др пищевых продуктов.

14 Микробиологическая диагностика и профилактика стрептококковых заболевании Методы диагностики: Основной метод диагностики – бактериологический. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на кровяной агар для получения изолированных колоний. Затем производят учет результатов посева: характрер колонии, характер гемолиза. По характреу гемолиза на кровяном агаре стрептококки делятся на 3 группы: а – b-гемолитические – образуют вокруг колонии полностью прозраз

ную зону гемолиза, б – a-гемолитические – неполный гемолиз, образующийся метHb дает зеленоватый оттенок (зеленящий стрептококк), в – g – негемолитические стрептококки.Затемвыросши е изолированные колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры. Заключительный этап – идентификация чистой культуры по культуральным признакам, сероидентификация и серотипирование (определение серогруппы). Серогруппу стрептококков определяют в реакции преципитации с экстрактом из иссле

дуемой культуры и группоспецифическими сыворотками (4 наиболее распространенные серогруппы – А, В, С, Д). Иммунитет: антитоксический, антимикробный, типоспецифический, нестойкий, с тенденцией к подавлению фагоцитоза, с образованием L-форм, к хронизации процесса. Специфической профилактики нет. Лечение – антибиотикотерапия.

6 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Сифилиса. Методы диагностики: 1 – микроскопический (1-2 ст), 2 – серологический (реагиновые тесты, когда в качестве антигена используют кардиолипиновый антиген из сердечной мышцы быка), 3 – специфические реакции, когда используются трепонемальные тесты (трепонема Никольса – культуральные спирохеты, выращенные на искуственной питательной среде и не обладающие вирулентностью, антигенными св-ми отличаются от

бледной спирохеты). Из трепонемальных тестов в настоящее время используют иммунофлюорисцентный адсорбционный тест (ИФАТ) и трепонемальную микрогемагглютинацию. Постановка реакции Вассермана: Для постановки реакции связывания комплемента по Вассерману при подозрении на сифилис необходимы сле­дующие компоненты: 1. Исследуемая сыворотка больного в разведении 1:5. Исследуемую сыворотку необходимо прогреть в тече­ние 30 минут при температуре 56°С для разрушения (инакти

вации) комплемента. 2.Неспецифический антиген – кардиолипиновый анти­ген – холестеринизированный спиртовой экстракт из сердечной мышцы быка. 3.Комплемент – в качестве комплемента используют сыворотку морской свинки. Так как количество ком­племента должно быть строго определенным, компле­мент берут в рабочей дозе (титр, увеличенный на 25-30%). Титр комплемента – это минимальное его коли­чество, при котором еще происходит гемолиз.. 4.Гемолитическая система – это смесь гемо

литической сыворотки и эритроцитов барана, которую перед по­становкой РСК выдерживают в термостате при 37°С в течении 30 минут для адсорбции гемолизинов на по­верхности эритроцитов. Реакцию Вассермана ставят по методи­ке РСК. Отсутствие гемолиза в опытной пробирке свидетельствует о положительной реакции Вассер­мана. Наличие гемолиза в опытной пробирке – отрицательная реакция Вассермана (человек здоров). Иммунитет изучен недостаточно 1 ст у 30% болезнь заканчивается самоизличением и по

вторного заражения не происходит. 2 ст у части людей не происходит заражения на второй стадии, т.к спирохета не изменяет свои антигенные св-ва. Профилактика: специфической профилактики нет, неспецифическая – соблюдени правил гигиены, учет и госпитализация больных сифилисом.

12 Микробиологическая диагностика и профилактика стфилококковых заболеваний. Лечениеи профилактика: а – вакцины, сыворотки, g-глобулины – для всех инфекций, б – профилактика–стафилококко вый анатоксин – вводится тем лицам, которым предстоят серьезные пластические операции. Смотрим на стойкость иммунитета и на типоспецифичность. С целью лечения стафилококковый анатоксин может использоваться при хронических инфекциях (пиодермия, пневмония, остеомиелит). Для про

филактики – искусственный, активный, антитоксический стафилококковый анатоксин; в – аутовакцинотерапия – от больного выделяют его штамм стафилококка, убивает его и вводят собственный аутоштамм; г – стафилококковый g-глобулин (содержит антитела) – применяютдлялечения хронических инфекций, д – гиперимунная антитоксическая донорская плазма – получают путем иммунизации донора стафилококковым анатоксином; применяют для лечения стафилококкового сепсиса. Методы диагностики. Основной ме

тод диагностики – бактериологический. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на кровяной, молочно-солевой и желточно-солевой агары. Выросшие изолированные колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры. Идентификацию чистой культуры проводят по морфологическим, культуральным и б/х св-вам, затем определяют факторы вирулентности. Для определения гемолитических св-в экзотоксина культура стафилококка засевается на кровяной агар и опреде

ляется зона гемолиза. Для определния фермента лецитиназы стафилококк засевают на желточно-солевой агар – вокруг колонии – зона помутнения среды за счет ресщепления лецитина. Для определения фермента плазмокоагулазы стафилококк засевают в цитратную плазму – происходит коагуляция плазмы с образованием сгустка фибрина. Для патогенного стафилококка хар-но сбраживание маннита в анаэробных условиях – при расщеплении маннита образуются кислые продукты, которые изменяют цвет индикато

ра в среде (индикатор Андреде – красная окраска, ВР – синюю). С целью идентификации можно провести фаготипирование. При стафилококковых инфекциях необходимо проверять чувствительность к антибиотикам (метод дисков). Лекарственная резистентонсть обуловлена: синтезом b-лактамазы, R-плазмидами,лизогеннойко нверсией.

11 Морфологические культуральные и биохимические свойства стафилококков. Факторы вирулентности. Вызывает пиодермию, остеомиелит, токсикоз. 1 – Морфологическая хар-ка: Гр + кокки, расп в чистой культуре гроздьевидно. У некоторых имеется микрокапсула. На поверхности имеется белок А – способствует адгезии. 2 – Культуральные св-ва: по типу дыхания – факультативный анаэроб, неприхотлив. Устойчив к концентрации соли до 10% NaCl. Элективные среды: солевой агар, молочно-солевой

агар, желточно-солевой агар (на нем определяют фермент лецитиназу). Б/х активность – слабая, выражена ферментация маннита. 3 – Антигенная структура разнобразна, его типируют по чувствительности к бактериофагам – фаготип. Имеет эпидемиологическое значение. Стафилококк выделяет пигмент: золотистый (s. aurus) – патогенный, белый (s. еpidermidis) – на коже, лимонно-желтый (s. saprophiticus). 4 – Факторы вирулентности: а – факторы адгезии – белок А – неспецифически связывает Fc-фрагмент а/т и тем самым

уменьшает кол-во а/т – препятствует фагоцитозу, б – факторы инвазивности (агрессии): гиалуронидаза, плазмокоагулаза, коллагеназа, фибринолизин, ДНКаза, в – факторы токсичности: выделяет экзотоксин, кот обладает различными биологич св-вами: гемолизин (растворяет эритроциты), лейкоцидин (растворяет лейкоциты), энтеротоксин (вызывает ПТИ, гастроколиэнтериты у детей грудного возраста), эксфолиативный токсин (вызывает пузырчатку новорожденных, у взрослых – стафилококковую эпидермию), этот экзоток

син является супера/г, вызывает синдром токсического шока – неспецифическая реакция с выделением цитокинов. Стафилококк явл антагонистом по отношению к некоторым микробам за счет выделения лизоцима. Иммунитет – антитоксический, антибактериальный, типоспецифический, кратковременный, имеет место тенденция к хронизации процесса за счет снижения уровня фагоцитоза, неспецифического связывания антител, за счет перехода в L-формы и за счет появления лекарственно-резистентых штаммов. Лекарст

венная резистентонсть обуловлена: синтезом b-лактамазы, R-плазмидами (передаются путем коньюгации), r-плазмидами – нетрансмиссивная, передается путем трансдукции (с помощью умеренного фага).

13 Морфологические культуральные и биохимические свойства стрептококков. Факторы вирулентности.(S.Mutans). Вызывает ревматизм, скарлатину, рожистое воспаление, эндокардит, гломерулонефрит. Является резидентом человека. Морфологическая хар-ка: Гр+ кокки, располагаются в виде цепочки, имеют микрокапсулу, иногда имеют вытянутую форму (стрептококки гр Д – энтерококки). Культуральные св-ва: мелкие, точечные, бесцветные колонии, требовательны к добавлению сахаров и хорошо растут на

кровяном агаре. Они факультативные анаэробы, фермента каталазы у них нет, а в крови есть. Встречаются строгие анаэробы – пептострептококки (они наши резиденты, могут учавствовать в оппортунистических инфекциях). Классификация в зависимости от характра роста на кровяном агаре: а – b-гемолитический стрептококк, б – a-гемолиз – неполный гемолиз, образующийся метHb дает зеленоватый оттенок (зеленящий стрептококк), в – g – негемолитические стрептококки. S. Mutans является основой образования зуб

ного налета. Расщепляет сахарозу с декстраном, образует липкий полимер, к которому прилипают другие микробы. Факторы вирулентности: 1 – выделяет гемолизин: стрептолизин О и стрептолизин S. Титры антистрептолизина О свидетельствуют о наличии хронической стрептококковой инфекции (фронтит, гайморит, пародонтит, цистит), 2 – выделяет фибринолизин – стрептокиназу, 3 – выделяет стрептодорназу – разрушает ДНК, 4 – выделяет фактор М – связывает Ig, 5 – имеет микрокапсулу, 6 – имеет факторы инвазивно

сти – гиалуронидаза, 7 – имеет протеиназу – разушает комплемент, тем самым нарушает фагоцитоз, 8 – имеет экзотоксин, который обладает гемолитическим и летальным св-вами, разрушает лейкоциты (лейкоцедин), а у скарлатинозного стрептококка имеется эритрогенный токсин (вызывает алую сыпь).

5 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Сифилиса. Факторы вирулентности. T..pallidum (бледная спирохета) – возбудитель. Сифилис – это длительное циклическое заболевание поражающее у чел органы и ткани, является антропонозным. Морфология: имеют спирально скрученные миофибриллы, микрокапсулу, пептидогликаны, клеточную стенку (состоит из 3х слоев и в ней нет липида А). Бледная спирохета окрашивается по Романовскому–Гимза в бледно – розовый цвет, а

наши резиденты в голубой цвет (обитают на слизистых оболочках). Под действием лек препаратов и антител превращается в L формы, образует гранулярные формы и цисты. По типу дыхания – анаэроб. Плохая окраска связана с низким содержанием нуклеопротеидов. Культивирование: культуральная спирохета (спирохета Рейтера) – авирулентная и с измененными антигенами. Тканевая спирохета (Никольса) – получают заражением кролика в яички (тестикулярная культура). Антигенная структура – имеет 4 антигена:

белковый, полисахаридный, 2-а липидных: первый имеет общие эпитопы с липидами сердца, а второй с липидами нервной ткани человека. Источник – больной человек. Пути передачи – половой, контактный, реже бытовой, т.к она быстро погибает в окружающей среде, чувствительна к высоким температурам (45С), раствору сулеймы и сохраняется при низких температурах. Факторы вирулентности: токсинов у нее нет, размножается во внеклеточном пространстве, есть фермент гиалуронидаза, будучи без клеточной стенки

и имеющей микрокапсулу обладает большой агрессивностью.

7 Морфологические, культуральные, биохимические свойства Кишечной палочки. Роль кишечной палочки в инфекционной патологии у человека. Морфологические свойства: Е.Соli – мелкиеГр-палочки с закругленными концами, перетрих (много жгутиков), иногда образуют микрокапсулу. Культуральные свойства: Е.Соli – факультативный анаэроб, не требовательна к питательным средам, хорошо растет на простых питательных средах. Для диагностики используют дифференциально-

диагностические среды (Эндо, Левина). Ферментативная активность: в течении 24 часов ферментирует лактозу с образованием кислоты и СО2, а белок – с образованием индола. Антигенная стуктура: Е.Соli обладает О-антигеном (соматический), Н-антигеном (жгутиковый) и К-антигеном (капсульный). К-антиген неоднороден – состоит из термостабильных антигенов (А и М) и термолабильных (L, B, Vi). Идентификация идет по О- и Н-антигену. Положительная роль Е.Соli: 1 – Является антагонистом по

отношению к патогенным и гнилостным бактериям, за счет того, что она является возбудителем молочно-кислого брожения (образует кислую среду). Образует колицины – антибиотикоподобные вещества. 2 – Синтез витаминов группы В и К. 3 – Участие в процессах расщепления. 4 – Стимулирует образование на слизистых оболочках sIgA. Отрицательная роль: при ослаблении защитных свойств организма Е.Соli может стать причиной развития кишечных инфекций и некишечных инфекций (цистит, отит).

Уменьшение количества Е.Соli приводит к дисбактериозу (при лечении антибиотиками). Факторы вирулентности: пили, гиалуронидаза (фермент инвазивности), эндотоксин.

9 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителяХолеры.Морфоло гические свойства: холерный вибрион – слегка изогнутая Гр- палочка, имеет жгутик, иногда окружаетсебякапсулой из муцина, что закрывает поверхностные антигены. Культуральные свойства: по типу дыхания аэроб, очень неприхотлив, растет на самых простых средах (даже на 1% пептонной воде), растет при рН 8,2-8,4 (используется в элективных средах). Дифференциально-диагности ческой средой является TCBS, на

которой колонии холерного вибриона желтого цвета. Антигенные структуры: О-антиген (соматический) и Н-антиген (жгутиковый). В О-антигене есть антигены А,В,С, по которым различают 3 серовара: Огава (А,В), Инаба (А,С), Гикошима (А,В,С). Для вакцины используют серовары Огава и Инаба.. Биохимические свойства: при идентификации важным является отношение холерного вибриона к маннозе, арабинозе и сахарозе. По способности ферментировать эти углеводы семейство Vibrionaceae делят на 8 групп. Хо

лерный вибрион относится к первой группе (манноза+, арабиноза-, сахароза+). Факторы вирулентности: 1 – муциназа – расщипляет муцин, который выстилает эпителий кишечника. 2 – нейроминидаза – фермент инвазивности.. 3 – фибринолизин, 4 – плазмокоагулаза, 5 – эндотоксин, 5 – экзотоксин.

30 Возбудители СПИДа, методы диагностики и профилактики болезни. Возбудители ВИЧ-инфекции относится к семейству ретровирусы. Представители этого семейства поражают самых различных животных – грызунов, птиц, млекопитающих, человека. Вирусы входящие в это семейство являются РНК-овыми, они способны с помощью фермента обратной транскриптазы образовывать ДНК на матрице вирусной РНК. ДНК затем способна встраиваться в хромосому клетки и существовать там. Этим обусловлены осо

бенности эпидемиологии ретровирусных инфекций — наличие как горизонтального, так и вертикального пути передачи. Диагностика: а/т появляются через 3-6 мес. в незначительном титре. Используют р-цию иммуноферментного анализа. Если реакция положительна, ставится повторная. Затем проводится р-ция иммуноблодинг (пятно), которая совмещает разрешающую способность электрофореза и иммуноферментного анализа. Также применяется лабораторная диагностика на нахождение вирусного генома в поли

меразной цепной реакции. Профилактика. Только неспецифическая. Кровь для переливания должна обязательно тестироваться на содержание ВИЧ. Попытки создать вакцины, в том числе генноинженерия, производящиеся во всем мире пока успеха не имеют.

16 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика менингита. Методы диагностики: Основной метод диагностики – бактериологический: 1 – при подозрении на менингококконосительство мазок из носоглотки засевают петлей на сывороточный агар с добавлением ристомицина, который подавляет рост Гр+ флоры, затем ставят в термостат (37°С). При этом могут вырасти N. Meningitidis и нейсерии-резиденты (N. Catarrhalis). Выросшие изолированные колонии пересевают на скошен

Смотрите так же:  Болит ухо после простуды как лечить

ный сывороточный агар для получения чистой культуры. Затем проводят идентификацию: б/х – слабо активен, серодиагностика – по капсульным антигенам, ПЦР. Полученную культуру засевают на сывороточный агар при t +22° — вырастет N. Catarrhalis, на МПА – вырастет N. Catarrhalis и на сывороточный агар при t +37° — вырастет N. Meningitidis. 2 – при подозрении на менингококковую инфекцию центрифугируют спиномозговую жидкость, делают мазок ® если в мазке “чистые” лейкоциты (без менингококка),

то возникает подозрение, что они подверглись аутолизу. Тогда делают реакцию кольцепреципитации – в каждой пробирке находится сыворотка к определенной серогруппе; в какой пробирке реакция кольцепреципитации положительна Þ такой тип менингита у больного. Есливмазке менингококк находится в самом лейкоците и вне его, тогда засевают на сывороточнй агар при t 37°,. Выросшие колониипересеваютна скошенный сывороточный агар для получения чистой культуры. Затем проводят идентификацию:

б/х – слабо активен, серодиагностика – по капсульным антигенам. Иммунитет – стойкий, антимикробный, имеется “врожденная” устойчивость. Профилактика и лечение: профилактика – вакцинация – химическая вакцина, которая получена из капсульных полисахаридов типа А и С и обладают протективными св-вами. У детей до 2-3 лет антиген С не иммуногенен (не создает иммунологической памяти). Лечение – антибиотикотерапия.

18 Микробиологическая диагностика и профилактика гонореи. 11 Гонококк. Методы диагностики. Острая гонорея, ведущий метод – микроскопический. Из исследуемого материала делают два мазка, один окрашивают по Граму, другой – метиленовым синим. При наличии в мазке гонококков видны грам- диплококки, расположенныевнутрилейкоц итов (незавершенный фагоцитоз). При хронической гонорее гонококки нах вне клеток, и имеют атипичную форму в виде шаров или мелких образований. Поэтому для

диагностики хронической гонореи применяют серологический метод (РСК, РПГА), бактериологический метод. Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашки Петри со специальными питательными средами — КДС, сывороточным агаром и др. Среда КДС содержит питательный агар с добавлением казеина, дрожжевого экстракта и сыворот­ки крови. Посевы инкубируют при 37 «С в атмосфере с повы­шенным содержанием СО2 (не менее 3 %) в течение 24—72 ч. Гонококки образуют круглые прозрачные

колонии, напоми­нающие капли росы. Подозрительные ко­лонии пересевают в пробирки на соответствующие среды для получения чистых культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах «пестрого» ряда (полужид­кий агар с сывороткой и углеводом) или с помощью микро­тест-систем. Гонококки ферментируют только глюкозу с обра­зованием кислоты. Серологический диагноз ставят с помощью РСК. Реакция ставится для обнаружения антител в сыворотке крови больного, с помощью из

вестного антигена, которое представляет собой взвесь убитых гонококков.Учет результата реакции начинают с контрольных пробирок. При наличии гемолиза в контрольных пробирках, о результатах опыта судят по опытной пробирке.

20 Специфическая профилактика и терапия столбняка. Профилактика столбняка складывается из плановой и экстренной. 1 Плановая профилактика – всех детей с 3-х месячного возраста вакцинируют вакцинами: АДС, АКДС, Тетровак в состав которых входит столбнячный анатоксин (обезвреженный экзатоксин) – это активная профилактика (создается иммунологическая память). АДС – адсорбированный дифтерийный и столбнячный анатоксин. АКДС – адсорбированная коклюшно – дифтерийная столбнячная сы

воротка (убитые коклюшные палочки – против коклюша – аллергический компанент). Тетровак – убитые коклюшные палочки, дифтерийно — столбнячные анатоксины, вакцина против полиомиелита (убитая). Пентовак – добовляют вирус краснухи. Ревакцинация по каллендарному плану. 2 Экстренная профилактика – при травмах, ожогах, отморажениях. Она складывается: а) Активная профилактика – введение столбнячного адсорбированного анатоксина. б) Пассивная профилактика – введение ПСС (противо

столбнячная адсорбированная сыворотка) которая вводится дробно по Безредко в целях профилактики анафилактического шока. Диагностика. При стертой клинически не выраженной форме столбняка столбнячный анатоксин можно обнаружить в крови пациента с помощью биологического метода. Опытную мышь заражают смесью матерьяла + антитоксическая сыворотка. Контрольную мышь заражаем только исследуемым материалом (экзотаксин). Заражение проводят вблизи хвоста. Через 12-24 часа у контроль

ной мышки наблюдается сокращение околохвостовой мышцы и хвост торчит – начинается восходящий столбняк. У опытной мышки симптомов не наблюдается, за счет нейтрализации экзотоксина. Терапия: для лечения применяют противостолбнячную антитоксическую чыворотку или противостолбнячный иммуноглобулин человека.

10 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Холеры. Из материала (рвотные массы, фекалии, вода) делают экспресс-диагностику: 1 – ПЦР (наход чужеродную ДНК). 2 – РИФ (обраб материал О1 люминисцентной сывороткой). Из этого же материала – бактериологический метод: РИС. Идентификация: 1 – Подвижность в темном поле зрения. 2 – Биохимическая активность. 3 – О1-агглютинация и определение сероваров. 4 – Определение биоваров – чувствительны к

бактериофагам и к полимексину, способны склеивать куриные эритроциты. При отсутствии агглютинации можно разрушить капсулу из муцина нагреванием или использовать биологический метод (Исаева-Пфейффера) – выявление бактериолизинов. В брюшную полость морским свинкам вводят неизвестную бактериальную культуру. Одной свинке туда же вводят сыворотку. Затем из брюшной полости берут экссудат и в течении 1-2 часов смотрят в темном поле зрения. Сначала вибрион теряет

подвижность, затем лизируются, т.к у свинки много комплемента – идет реакция бактериолиза. Специфическая профилактика: 1 – Убитая вакцина Огава и Инаба. 2 – Живая авирулентная вакцина. 3 – Холероген анатоксин.

17 Морфологические культуральные и биохимические свойства гонококков. Факторы вирулентности. Вызывает гонорею и бленорею (поражение эпителия роговицы). Морфологич хар-ка: Гр- , бобовидной диплококк, окружены микрокапсулой, жгутиков не имеют, спор не образуют. Для гонококков хар-но наличие пили. Культуральные св-ва: требователен к культивированию. Он аэроб и требует наличие человеческого белка (чел сыворотка, асцитическая жидкость), лучше растут при содержании 5-10% СО2, из

углеводов ферментируют только глюкозу. Антигенные св-ва: неоднородные, антигенная структура гонококков изменчива. Факторы вирулентности: капсула, пили, s-IgA-протеаза, гиалуронидаза, эндотоксин, в кл стенки имеется белок I и II с которым связывают явление незавершенного фагоцитоза. Источник – больной с острой хронической формой. Путь передачи – половой. Иммунитет – антимикробный, типоспецифический, не стойкий. Профилактика – всем новорожденным закапывают в глаза 1% азотнокислое

серебро или сульфацил натрия. Взвесь убитых гонококков используют для вакцинотерапии хронической гонореи.

23 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Газовой гангрены. Факторы вирулентности. Возбудителями газовой гангрены являются Clostridium perfringens, Cl novyi,Clsepticum, Cl histolyticum. Морфологические свойства: Cl perfringens – Гр+ палочка, образует капсулу, жгутиков нет, образует субтерминальные споры. Cl novyi – Гр+ палочки, капсулы не образует, есть жгутики, образует терминальные или субтерминальные споры. Cl septicum и Cl

histolyticum – Гр+ палочка, капсулы не образует, есть жгутики, образует субтерминальные споры. Культуральные свойства: все 4 возбудителя культивируются на жидких и плотных питательных средах в анаэробных условиях. Cl perfringens образует круглые плоские колонии, Cl novyi – пушистый комок с уплотнением в центре, Cl septicum – колючки, Cl histolyticum – плотные зернышки. Биохимические свойства: Cl perfringens расщепляет гликоген с образованием СО2, Cl histolyticum имеет протеолитические

ферменты. Факторы вирулентности: Все 4 возбудителя имеют a-токсин, который обладает летальным,гемолитическим, некротическим свойствами.

26 Микробиологическая диагностика бруцеллеза. Острая стадия – (бак. метод) длится до 40 дней. Исследуемый матерьял: кровь, моча. Исследуемый матерьял > печеночный бульон > каждые 7 дней высевают на печеночный агар > ЧК > идентификация: 1приготовлен мазок. 2чувствительность к анилиновым красителям. 3биохимическая активность – выделение сероводорода (suis). 4р-ция агглютинации. Серологический метод становится положительным начиная с 10-15 дняболезни. Титр а/т уменьшается в процессе

выздоровления. Ставят р-цию агглютинации Райта Хеддельсона на стекле. Реакция Райта ставится при разведении сыворотки 1:100 – 1:800, диагностикумом Райта (смесь убитых 3-х видов бруцел). Реакция Райта положительна 1:800, человек болен бруцеллезом. При массовом обследование людей на заболевание ставим реакцию Хеддельсона с неразведенной сывороткой в разных объемах. Для того, чтобы реакция была видимой, диагностикум подкрашивают. При положительной пробе Хеддельсона, ставят реакцию

19 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Столбняка. Факторы вирулентности. Возбудитель столбняка – Clostridiumtetani.Морфоло гические свойства: Гр+ палочка, перитрих, образует терминально расположенную круглую спору. Культуральные свойства: строгий анаэроб. При выращивании на жидких питательных средах продуцирует сильный экзотоксин. На плотных питательных средах формирует прозрачные или слегка сероватые колонии с шероховатой по

верхностью. Биохимические свойства: обладает слабыми протеолитическими свойствами, углеводов не расщепляет. Антигенная структура: по Н-антигену (жгутиковый) Сl. Tetani делят на 10 сероваров. О-антиген – общий для всего вида. Факторы вирулентности: основной фактор вирулентности – экзотоксин, состоящий из тетанолизина (вызывает гемолиз) и тетаноспазмина (поражает нервную систему).

21 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Ботулизма. Факторы вирулентности. Возбудитель – Clostridium botulinum. Морфологические свойства: Гр+ палочки, образуют субтерминально расположенные споры и имеют вид теннисной ракетки. Перитрихи, капсулы не образуют. Культуральные свйства: строгий анаэроб. Растет при температуре 25-35° при рН 7,2-7,4. На кровяном агареобразуетнебольшие прозрачные колонии, окруженные зоной гемолиза. В столбике сахар

ного агара колонии имеют вид пушинок или зерен чечевицы. Очень устойчива – выдерживает кипячение до 20 часов. Биохимические свойства: большой набор сахаролитических и протеолитических ферментов. Антигенные свойства: для идентификации важен экзотоксин; различают 7 сероваров возбудителя ботулизма (A,B,C,D,E,F,G), наиболее распространены A,B,Е. Факторы вирулентности: Экзотоксин, обладающий нейротоксическим и гемагглютинирующим действием.

24 Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и терапия Газовой гангрены. Диагноз газовой гангрены ставят на основании клиники. Ускоренная диагностика газовой гангрены: раневое отделяемое засевают на среды Китта-Тароцци, молоко и среду Вальсен-Блера. При наличии Clostridium perfringens через 6 часов молоко створаживается и сгусток разрывается. Среда Вальсен-Блера чернеет и разрывается из-за образования СО2. На среде Китта-Тароцци наблюдается помутнение и в

мазке определяют Гр+ палочки, расположенных попарно. Профилактика: правильная хирургическая обработка ран, соблюдение асептики и антисептики при операциях. Для активной иммунизации применяют анатоксины против газовой гангрены в составе секстанатоксина. Прививки проводят по специальным показаниям (военнослужащие). Терапия: антитоксическая сыворотка, которой обкалывают рану при являются Clostridium perfringens, Cl novyi иClsepticum..

25 Морфологические культуральные и биохимические свойства возбудителей бру­целлеза . Факторы вирулентности. Вовбудителями являются: 1 Brucella melitensis (источник мелкий рогатый скот). 2 B. bovis (крупный рогатый скот). 3 B. suis (источник свиньи). Морфологические свойства – это грам-, овоидные палочки. B. bovis микроаэрофил (требует наличия 10% СО2). Спор и капсул необразует и не имеет жгитиков. Больной чел для окружающих не заразен. Культуральные свойства: требовательна, рас

тет на печеночных и сывороточных средах (долго). Биохимические св-ва. Не образуют протеолитических ферментов, обладают слабой сахаролитической способностью. Вызывают гидролиз аминокислот, белков с образованием аммиака и сероводорода. Факторы вирулентости: факторы инвазивности, незавершенный фагоцитоз, гиалуронидаза, эндотоксин.

5 Морфологические, культуральные и биохимические свойства менингококков. Факторы вирулентности. 1 –Морфологические св-ва: Гр- диплококки, имеютбобовиднуюформу, вогнутыми поверх-ми обращены др к другу. Имеет пили и капсулу. 2 – Культуральные св-ва: аэроб, необычайно прихотлив (t – 36-38 C), на простых средах не растет; растет на сыворотке с добавлением белка, на селективной среде с ристомицином, б/х слабо активен. Повышенная концентрация СО2 (5-10%) стимулирует рост менинго

кокков. 3 – Антигенные св-ва: по капсульному полисахаридному антигену различают несколько серогрупп: А (чаще), В, С, Д… 4 – Факторы вирулентности: а – пили, б – s-IgA-протеаза – фермент, расщепляющий секреторный Ig, в – фермент инвазивности – гиалуронидаза, г – эндотоксин (липополисахарид клеточной стенки).

22 Диагностика и специфическая терапия Ботулизма. Для ботулизма характерна клиника, поэтому бактериологический метод используют редко. Применяют биологический метод: мышке вводят материал от больного вместе с сывороткой определенного типа. Какая мышка выжила – тот серотип Сl. Botulinum у больного. Для лечения вводят поливалентную сыворотку.

27 Характеристика неклостридиальных форм бактерий, возбудителей анаэробных процессов. Неклостридиальные анаэробы – это резиденты, которые могут вызывать различные воспалительные процессы. К ним относят: 1 – Bacteroides – Гр- палочки. Самая неприятная–Bacteroides fragilis – резистентна ко многим антибиотикам (пенициллину, цефалоспорину, канамицину). 2 – Fusobacterium – Гр-палочки;соединяясь с бактериями полости рта (спирохетами) вызывают язвенно-некротические поражения (ангина, стоматит).

3 – Пептострептококки – Гр+ палочки; вызывают гнойные процессы везде. 4 – Актиномицеты – Гр+ палочки; вызывают актиномикоз костей и мягких тканей.

1 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Дифтерии. Факторы вирулентности

2 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Дифтерии

3 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Туберкулеза. Факторы вирулентности

4 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Туберкулеза

5 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Сифилиса. Факторы вирулентности

6 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Сифилиса

7 Морфологические, культуральные, биохимические свойства Кишечной палочки. Роль кишечной палочки в инфекционной патологии у человека

8 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных заболеваний

9 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Холеры

10 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Холеры

11 Морфологические культуральные и биохимические свойства стафилококков. Факторы вирулентности

12 Микробиологическая диагностика и профилактика стфилококковых заболеваний

13 Морфологические культуральные и биохимические свойства стрептококков. Факторы вирулентности. (S. Mutans).

14 Микробиологическая диагностика и профилактика стрептококковых заболевании

15 Морфологические, культуральные и биохимические свойства менингококков. Факторы вирулентности

16 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика менингита

17 Морфологические культуральные и биохимические свойства гонококков. Факторы вирулентности

18 Микробиологическая диагностика и профилактика гонореи. 11 Гонококк. Методы диагностики

19 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Столбняка. Факторы вирулентности

20 Специфическая профилактика и терапия столбняка

21 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Ботулизма. Факторы вирулентности

22 Диагностика и специфическая терапия Ботулизма

23 Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Газовой гангрены. Факторы вирулентности

24 Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и терапия Газовой гангрены

25 Морфологические культуральные и биохимические свойства возбудителей бру­целлеза . Факторы вирулентности

26 Микробиологическая диагностика бруцеллеза

27 Характеристика неклостридиальных форм бактерий, возбудителей анаэробных процессов

28 Возбудители гриппа, методы лабораторной диагностики. Антигенная изменчивость виpyca. Специфическая профилактика гриппа

29 Возбудителтг гепатита, методы лабораторной диагностики и специфической про­филактики гепатита

30 Возбудители СПИДа, методы диагностики и профилактики болезни

15 Способы стерилизации в микробиологии. I. Физические методы. Воздействие высоких темпе­ратур. Высокая температура обладает микробицидным действи­ем благодаря способности вызывать денатурацию белков. Стерилизация сухим жаром в сушилъно-стерилизационном шкафу (пени Пастера) основана на бактерицидном действии нагретого до 165—170 °С воздуха в течение 45 мин. Сухим жаром стерилизуют стеклянную посуду (чашки Петри, пробирки, пи­петки и др.). Автоклавирование — стерилизация перегре

тым водяным паром (при повышенном давлении) в паровом стерилизаторе (автоклаве). Многие питательные среды, перевязочный матери­ал, белье стерилизуют при давлении 1 атм в течение 15—20 мин, питательные среды с углеводами — при 0,5 атм в течение 15 мин, а обеззараживание инфицированного материала про­изводят при 1,5—2 атм в течение 20—25 мин. Стерилизация текучим паром осуществляется в автоклаве при незавинченной крышке и открытом выпускном кране. Данный способ стерилизации основан

на антибактериальном действии пара в отношении вегетативных клеток. Он приме­няется в тех случаях, когда стерилизуемый материал не выдер­живает высокой температуры, например питательные среды с витаминами, углеводами. Тиндализация — это дробная стерилизация материалов при 56—58 °С в течение 1 ч 5—6 дней подряд. Применяется для стерилизации легко разрушающихся при высокой температуре веществ (сыворотка крови, витамины и др.). Прокаливание в пламени спиртовки или газовой горелки приме

няют ограниченно, например для стерилизации бактериоло­гических петель, игл, пинцетов. Воздействие ионизирующих излучений. Микробицидное действие ионизирующих излучений основано на их способности вызывать повреждения в молекуле ДНК. Для сте­рилизации одноразовых медицинских инструментов и бактери­ологического оборудования, обычно применяют стерилизацию гамма-излучением. II. Механические методы. Основаны на фильтровании через специальные мембранные фильтры с малым размером

пор, способные механически задерживать микроорганизмы. В лабо­раторной практике широко применяют бумажные и полимер­ные фильтры. Фильтрование ис­пользуют для стерилизации жидких материалов, не выдержива­ющих нагревания (сыворотка крови, растворы антимикробных препаратов, компоненты питательных сред для бактерий и культур клеток), для получения бактериальных токсинов и других продуктов жизнедеятельности бактерий. III. Химические методы. Основаны на обработке объекта химически

ми веществами и способными обеспечить полное уничтожение микрофлоры. Хи­мическую стерилизацию обычно применяют для обработки различных приборов и инструментов многоразового использо­вания, чувствительных к высоким температурам (фиброоптические приборы, медицинские имплантаты и др.).

30 Полимеразоцепная реакция (ПЦР), ИФА. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) -основаннана принципе многократного копирования (амплификации) определенного участка ДНК или РНК. ПЦР позволяет выявить малые фрагменты ДНК, характерные для определенного вида микробов, и точно идентифицировать этот вид. Постановка ПЦР включает следующие этапы: 1. Выделение ДНК (РНК) из исследуемого материала. Для этого клетки необходимо лизировать с помощью высокой температуры. Затем отде

лить ДНК от клеточных обломков и разрушить клеточные нуклеазы. 2. Копирование выделенных участков (копий) нуклеиновых к-от 1. В результате нагревания до 94 -95°С двойная цепь ДНК разделяется на две отдельные цепи. 2. К одноцепочечной ДНК присоединяется праймер. Праймер — это последовательность из 15 — 30 нуклеотидов, комплементарная маркерному фрагменту ДНК (т. е., тому фрагменту, который есть только у определяемого возбудителя заболевания). З.Синтез (элонгация) -достраивание

второй цепи ДНК. ДНК-полимераза присоединяет нуклеотиды к праймерам, достраивая двухцепочечные фрагменты ДНК (

при 72°С). Вновь синтезированные фрагменты ДНК служат матрицей для синтеза новых цепей в следующем цикле амплификации — это и есть цепная реакция в ПЦР. 3. Определение (детекция) продуктов ПЦР чаще всего проводят при помощи электрофореза. В ре­зультате видна оранжевая полоска на уровне контрольной ДНК. Иммуноферментный анализ (ИФА) — основан на использовании

двух разных по специфич­ности моноклональных антител против двух разных антиген­ных эпитопов в составе искомого антигена. В лунки с иммо­билизованными антителами против одного эпитопа добавляют материал, в котором ищут антиген. В процессе инкубации на твердой фазе образуется комплекс антиген—антитело. Затем лунки отмывают от несвязавшихся компонентов и добавляют меченные ферментом антитела против другого эпитопа того же антигена. После повторной инкубации и отмывания от избыт­

ка конъюгата антител с ферментом определяют количество свя­завшихся антител по их ферментативной активности в присутст­вии субстрата с индикатором. На стадии выявления иммунного комплекса антиген оказы­вается как бы зажатым между молекулами иммобилизированных и меченых антител, что послужило поводом для широко рас­пространенного в литературе названия «сэндвич»-метод .

5 Способы культивирования вирусов. Методы культивирования вирусов. Для культивирования ви­русов используют культуры клеток, куриные эмбрионы и чув­ствительных лабораторных животных. Культуры клеток. Представляют собой соматические или эмбриональные клетки животных или человека, культиви­руемые в лабораторных условиях. В культурах клеток удается культивировать большинство вирусов, вызывающих заболевания человека.Внутриклеточные паразиты оказывают цитопатическое дей­ствие (ЦПД)

на клетки, в которых происходит их репродукция. ЦПД может проявляться деструкцией (лизисом) зараженных клеток, изменением их морфологии (изменением размеров и формы самой клетки, клеточного ядра, появлением вакуолей или включений) и нарушением их функций. Куриные эмбрионы. Пригодны для культивирования хламидии, риккетсии и некоторых вирусов, патогенных для человека. Для получения чистых культур риккетсии, хламидии и ряда вирусов в диагностических целях исполь­зуют 8—12-

дневные куриные эмбрионы. К недостаткам данно­го метода относятся невозможность обнаружения исследуемого микроорганизма без предварительного вскрытия эмбриона. Для заражения куриных эмбрионов исследуемый материал вводят в аллантоисную и амниотическую полости в желточный мешок куриного эмбриона. Лабораторные животные. Видовая чувствительность животных, их возраст определяют репродуктивную способ­ность вирусов. Преимущество метода культивирования вирусов в ор­ганизме лабо

раторных животных перед другими состоит в воз­можности выделения тех вирусов, которые плохо репродуци­руются в культуре клеток или эмбрионе. К его недостаткам относятся высокая вероятность контаминации организма по­допытных животных посторонними вирусами.

6 Сущность и этапы бактериологичегого метода исследования. Бактериологический метод – это выделение чистой культуры микробов из исследуемого материала и ее идентификация. Этапы. I этап – выделение чистой культуры. 1-ый день. Исследуемый материал: а) ориентировочная микроскопия по Граму. б) плотная МПА (37С, 24часа). Цель 1-го дня: получить изолированные колонии. Колония – потомство одной клетки выращенное на плотной питательной среде. 2-ой день. 1. Макроскопическая хар-ка колоний. Парамет

ры: цвет, форма, размер, хар-р краев, хар-р поверхности, консистенция (крошковидная, плотная, слизистая, кородирующая). 2. Микроскопическая хар-ка. Из намеченной колонии приготовлен мазок, окрашен по Граму. 3. Из намеченной колонии делают посев на скошенный агар для получения ЧК (37С, 24часа). II этап – идентификация выделенной культуры. 3-ий день I. Идентификация: 1. Проверка чистоты выделенной культуры. Приготовлен мазок, окрашен по Граму (морфологические свойства). 2. Определение био

химической активности: ферментация углеводов и белков (культуральные свойства). 3. Сероидентификация (по а/г). 4. Факторы вирулентности (вирулентность – степень болезнетворности микроба обуслевленная факторами инвазивности и токсичности). 5. Фаготипирования ( определение чувствительности бактерий к бактериофагу, который вызывает лизис этой культуры.) II. Определение чувствительности к антибиотикам. 4-тый день. Учет результатов: 1 Определение вида по биохимической активности. 2 Определение

чувствительности исследуемой культуры к антибиотикам.

20 Варианты постановки реакции агглютинации. Реакция агглютинации (серологическая реакция) – склеивание клеток под действием а/т в присутствие электролита. Специфический фактор: 1. А/г – взвесь клеток (эритроциты, убитые и живые микробы). 2. А/т – агглютинирующая сыворотка (иммунизируют кролика взвесью соответствующих клеток). Неспецифический фактор – 3. 0,85% NaCl – электролит который делает реакцию видимой. С помощью реакции агглютинации можно определить неизвестный вид микроба

– сероидентификация, или выявить титр (количество) а/т – серодиагностика. Варианты постановки — 1 Реакция агглютинации на стекле – ставится с одним развидением диагностической агглютинирующей сыворотке, которая в зависимости от ее титра составляет 1:10, 1:25, 1:50, или 1:100. Предметное стекло делят на квадраты. В один из них наносят каплю NаСl, в другой каплю сыворотки. Затем петлей в каждую каплю вносят бактериальные культуры и перемешиваю до равномерной взвеси. Далее наблюдают за появлением

зерен и хлопьев агглютината (этим самым мы определяем видовую принадлежность). Учет через 3-5 мин. Для определения серовара необходимо поставить р-цию агглютинации с типоспецифическими сыворотками. 2. При постановки развернутой реакции агглютинации определяем титр а/т (это максимальное разведение, в котором обнаруживается агглютинация а/г), у пациента с целью диагностики заболевания. Диагностический титр при брюшном тифе 1:200. Реакция агглютинации положительна при титре 1:100. Для

уточнения диагноза необходимо поставить повторную реакцию через 5 дней.

4 Способы микроскопического изучения вирусов. 1 Электронная микроскопия позволяет изучить закономерности взаимодействия вируса и клетки, этапы морфогенеза вирусов в процесси репродукции. 2 Метод напыления металлами применяют для получения контрасных препаратов. Метод создает объемность изображения, позволяет хорошо изучить форму и величину вирусов, строение их поверхности, но внутренняя структура вируса недоступна. 3 Световая микроскопия, используется для изучения окрашенных объ

ектов в фиксированных препаратах. 4 Темнопольная микроскопия применяют для прижизненного изучения микробов в нативных неокрашенных препаратах. 5 Фазово — контрастная микроскопия предназначена для изучения нативных препаратов. Фазово – контрастная приспособление дает возможность увидить прозрачные объекты. 6 Люминесцентная (или флюоресцентная) микроскопия возникает в результате окрашивания препаратов специальными люминесцирующими красителями – флюорохромами. Этот

метод позволяет исследовать живые микробы. 7 Электронная микроскопия. Позволяет наблюдать объекты, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности светового микроскопа. Применяют для изучения вирусов, тонкого строения различных микроорганизмов.

19 Способы культивирования анаэробов. Все ма­нипуляции с анаэробами осуществлятся в бескислородных условиях. Для этого используют герметичные камеры с газовым составом среды. Посевы производят на специальные обогатительные (электив­ные) среды для анаэробов (тиогликолевую, Китта—Тароцци). Посевы инкубируют в специальных СО2-инкубаторах или в анаэростатах, которые помещают в обычный термостат. Для инкубации небольших по объему посевов (1—2 чашки Петри) приме-

няют пластиковые пакеты, содержащие газовую смесь, которая обеспечивает полное удаление кислорода из воздуш­ной среды в течение нескольких минут.

29 Постановка и использование, реакции торможения гемагглютинации. РТГА (р-ция торможения гемагглютинации) является вариантом р-ции нейтрализации вируса. Она основана на способности противовирусной антисыворотки подавлять вирисную гемагглютинацию эритроцитов определенных видов животных (кур, гусей и др.). Это объясняется способностью специфических антисывороток нейтрализовать вируные гемагглютинины, т.е проводят типирование вируса в РТГА с набором типоспецифических сыво

роток. РТГА широко применяется для идентификации и типирования вирусов, а также для выявления антигемагглютининов в сыворотке крови исследуемых людей.

18 Метод культуры ткани. Для выделения чистой культуры вируса из иследуемого материала применяют различные типы однослойных клеточных культур, а также куриные эмбрионы. Идентификацию вируса производят по ЦПД (появление гигантских многоядерных клеток). Характерное появление очагов избыточного роста клеток, приводит к образованию бляшек, изменению формы клеток с последующей дегенерацией и слущиванием монослоя. В зараженных клетках выявляются характерные включения. При за

рожении куриных эмбрионов, в положительном случае через 3-е суток наблюдается появление характерных белесоватых, непрозрачных выпуклых бляшек. Бляшка – это как бы колонии вирусов, которые вызвали гибель клетки. Сосчитав количество бляшек, можно определить количество вируса в материале. БОЕ (бляшко – образующее единица) используется для определения количества вируса в вакцине. Для выявления вируса также применяется цветная проба. Если в культуре клетки произошла репродукция вируса, то рН

Смотрите так же:  Профилактика гепатита в памятки

среды не меняется, т.к клетки погибли, и цвет среды не меняется.. Если репродукция не произошла, клетки живы выделяют метаболиты и изменяется рН. Для идентификации используют методы РТГА, ИФА позволяющие обнаружит вирусные а/г в зараженной культуре.

23 Методика постановки реакции связывания комплемента. РСК идет в 2-ух р-циях: 1.Р-ция гемолиза – это р-ция растворение эритроцитов при взаимодействии с гемолизинами (а/т) в присутствии комплемента. Компаненты: 1 а/г (эритроциты барана) 2. а/т – гемолитическая сыворотка (кролика иммунизируют бараними эритроцитами) 3. Комплемент (сыворотка морской свинки). Комплемент делает р-цию видимой т.е делает гемолиз. 2. Р-ция лизиса – растворение клеток при взаимодействии с а/т в присутствии ком

племента (причиной лизиса явл-ся комплемент) в его активации и образовании МАК. Р-ция гемолиза используется как индикатор свободного или связанного комплемента в РСК. В контроле комплемент всегда свободен, т.к отсутствует образование комплекса а/г+ а/т т.е в пробирках “лаковая кровь” (гемолиз+). Если идет р-ция лизиса т.е нет гемолиза — РСК+, то человек болен. Если идет р-ция гемолиза (гемолиз+) – РСК-, то человек здоров. Результат р-ции зависит от кол-ва комплемента. Исследуемую сыворотку необ

ходимо подогреть при t 56С – 30мин для иноктивации (разрушения). Комплемент (сыворотка) берут в строго определенном кол-ве – в рабочей дозе – это титр увеличенный на 25%. Титр – это минимальное кол-во комплемента необходимое для гемолиза. РСК используют при диагностике вирусных инфекций, бруцилезе, р-ция Вассермана.

1 Способы приготовления мазков для микроскопии. Техника приготовления мазков. Мазки готовят на обезжиренных предметных стеклах, предварительно обрисовав карандашом по стеклу место будущего мазка с противоположной стороны предметного стекла. При росте бактерий на жидкой питательной среде, материал берут стерильной бактериальной петлей, наносят на стекло и растирают над очерченной площадкой. В случае роста бактерии на плотной питательной среде, на предметное стекло предвари

тельно наносят спичкой каплю воды и материал растирают рядом с каплей посуху, а затем вносят петлей воду, постепенно готовя однородную взвесь. Бактериальную петлю перед использованием и с оставшейся культурой стерилизуют в пламени горелки: Приготовленный мазок высушивают на воздухе или держа высоко над пламенем спиртовки. После этого препарат фиксируют, для чего мазок стороной, где нет материала, троекратно проводят через середину пламени горелки. Фиксация позволяет убить микробы, прикре

пить их к стеклу и, наконец убитые микробы окрашиваются лучше, чем живые.

22 Методика постановки реакции бактериолиза. Реакция бактериолиза — растворение бактерий в присут­ствии специфических антител — бактериолизинов и компле­мента. Иммунный лизис бактерий можно наблюдать как в организме животного, так и в пробирке. Ингредиенты реакции: живые бактерии, специфические по отношению к ним антитела (им­мунная сыворотка или иммунизированное животное), компле­мент. Как защитная реакция бактериолиз наиболее выражен при холере, сальмонеллезных инфекци

ях. Многие виды бакте­рий не способны к лизису, поэтому реакция бактериолиза применяется редко. Постановка реакции бактериолиза in vitro: в опытную пробирку вносят взвесь живых бактерий, специфическую иммунную сыворотку и комплемент, в контрольную пробирку — те же бактерии, нормальную сыворотку (без антител) и комплемент. После двухчасового выдерживания пробирок в тер­мостате при 37°С из каждой пробирки делают высевы по 0,1 мл на чашки Петри с мясопептонным агаром. Опыт учи

тываю; после суточной инкубации: на чашке с высевом из опытной про­бирки колоний должно быть значительно меньше, чем а конт­роле.

21 Варианты постановки реакции преципитации. Реакция преципитации (серологическая р-ция) – это осаждение а/г из раствора в присутствии электролита. Компаненты: 1. А/г в коллойдном состояние (экстракт из клеток, моллекулы белка, полисахариды). 2. А/т – преципитирующаяся сыворотка (экстракт из клеток или отдельными а/г ). 3. Электралит 0,9% NаСl (чтобы реакция стала видимой ). Реакция сверхчувствительная и позволяет определить следы а/г или а/т. Варианты постановки:1 Реакция кольцепреципитация –

при положительной реакции на границе между сывороткой (а/т) и а/г появляется преципитат в виде белого кольца. 2 Реакция преципитации в геле – чашки заливают агаром, в котором вырезают несколько лунок. В центральную лунку вносят сыворотку содержащую а/т, а в остальные различные а/г. При диффузии реагентов в агаре, на месте встречи а/г и а/т образуются мутные полосы – усы преципитации. 3 Реакция термоприципитации – основана на термостабильности а/г, который получают путем кипячения (сибирская

26 Способы определения токсигенности культур. Определени токсигенности имеет важное значени при диагностике дифтерии. Токсигенность (способность к продукции дифтерийного токсина) определяют с помощью различных серологических реакций. Оп­ределение токсигенности – реакция преципитации в агаре с антитоксической противодифтерийной сывороткой: в чашку Петри с агаром, содержащим лошадиную сыворотку, мальтозу и цистин, кладут полоску фильтровальной бумаги, пропитанную анти­

токсической противодифтерийной сывороткой. Затем засевают исследуемые культуры в виде перпендикулярных к бумаге штрихов. В качестве контроля используют заведомо токсигенную куль­туру. Посевы инкубируют при 37″С до следующего дня. При размножении токсигенной культуры в месте соединения ток­сина с антитоксическими антителами образуется преципитат в виде белых линий — «усов».

25 Состав и цели использования минимальной среды. Минемальная среда – это питательная среда содержащая минеральные соли, источники углерода и азота, но не содержащая ростовых факторов. Прототрофы – это микробы, которые из глюкозы и солей амония могут синтезировать себе необходимые вещества. Ауксатрофы – они не могут синтезировать из глюкозы и солей амония необходимые вещества, т.е микроб нуждается в определенных веществах, которые он сам синтезировать не может – это фактор

роста. Ауксотрофные штамы в отличии от прототрофных на минимальных средах не растут. Цель – используют в генетики. В генетики этот способ был выделен при коньюгации (передача генетической информации от донора к реципиенту при непосредственном контакте клеток) и трансдукции (передача фрагмента двунитчатой ДНК от донора к реципиенту с помощью мутанта умеренного фага).

28 Постановка и использование реакции пассивной гемагглютинации. РПГА по сравнению с р-цией агглютинации, обладает более высокой чувствительностью, т.е можно опредилить низкий титр а/т или а/г. Постановка. В лунки с исследуемым материалом вносят одинаковый объем 3% суспензии нагруженных а/т эритроцитов. Через 2 часа инкубации при t 37 учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов. Выпадение эритроцитов в осадок в виде зонтика (положительная р-ция). При отрицательной

р-ции в лунках видны пуговки. Р-ция а/г + а/т происходит на пов-ти эритроцита (глазу невидно), но образуются крупные комплексы эритроцитов, которые выпадают в осадок. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для идентификации токсинов в исследуемом материале.

27 Постановка и использование реакции гемагглютинации. РПГА по сравнению с р-цией агглютинации, обладает более высокой чувствительностью, т.е можно опредилить низкий титр а/т или а/г. Постановка. В лунки с исследуемым материалом вносят одинаковый объем 3% суспензии нагруженных а/т эритроцитов. Через 2 часа инкубации при t 37 учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов. Выпадение эритроцитов в осадок в виде зонтика (положительная р-ция). При отрицательной р-ции в лун

ках видны пуговки. Р-ция а/г + а/т происходит на пов-ти эритроцита (глазу невидно), но образуются крупные комплексы эритроцитов, которые выпадают в осадок. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для идентификации токсинов в исследуемом материале.

ОКРАСКИ И РЕАКЦИИ 5

1 Способы приготовления мазков для микроскопии

2 Способы приготовления препаратов для изучения подвижности микробов

3 Принцип иммунолюминесцентного исследования материала

4 Способы микроскопического изучения вирусов

5 Способы культивирования вирусов

6 Сущность и этапы бактериологичегого метода исследования

7 Методика получения чистой культуры

8 Способы идентификации выделенной культуры

9 Способы определения чувствительности выделенной культуры к антибиотикам

10 Метод окраски препаратов ио Граму

11 Механизм окраски микробоя по Граму

12 Метод окраски препаратов по Цилю-Нильсеиу

13 Способы определения наличия у бактерий капсулы

14 Способы определения наличия у бактерии спор

15 Способы стерилизации в микробиологии

16 Способы стерилизации лабораторкой посуды

17 Способы стерилизации питательных сред

18 Метод культуры ткани

19 Способы культивирования анаэробов

20 Варианты постановки реакции агглютинации

21 Варианты постановки реакции преципитации

22 Методика постановки реакции бактериолиза

23 Методика постановки реакции связывания комплемента

24 Способ получения и цель применения гемолитической сыворотки

25 Состав и цели использования минимальной среды

26 Способы определения токсигенности культур

27 Постановка и использование реакции гемагглютинации

28 Постановка и использование реакции пассивной гемагглютинации

29 Постановка и использование, реакции торможения гемагглютинации

30 Полимеразоцепная реакция (ПЦР), ИФА

7 Методика получения чистой культуры. Выделение чистой культуры. 1-ый день. Исследуемый материал: а) ориентировочная микроскопия по Граму. б) плотная МПА (37С, 24часа). Цель 1-го дня: получить изолированные колонии. Колония – потомство одной клетки выращенное на плотной питательной среде. 2-ой день. 1. Макроскопическая хар-ка колоний. Параметры: цвет, форма, размер, хар-р краев, хар-р поверхности, консистенция (крошковидная, плотная, слизистая, кородирующая). 2. Микроскопическая

хар-ка. Из намеченной колонии приготовлен мазок, окрашен по Граму. 3. Из намеченной колонии делают посев на скошенный агар для получения ЧК (37С, 24часа).

8 Способы идентификации выделенной культуры. Идентификация: 1. Проверка чистоты выделенной культуры. Приготовлен мазок, окрашен по Граму (морфологические свойства). 2. Определение биохимической активности: ферментация углеводов с образованием к-ты и газа, и белков с образованием индола (культуральные свойства). 3. Сероидентификация (определение а/г у микроба с помощью известных иммунных сывороток т.е известные а/т). 4. Факторы вирулентности (вирулентность – степень болезнетворности

микроба обуслевленная факторами инвазивности и токсичности). 5. Фаготипирования ( определение чувствительности бактерий к бактериофагу, который вызывает лизис этой культуры.)

17 Способы стерилизации питательных сред. Автоклавирование — стерилизация перегретым водяным паром (при повышенном давлении) в паровом стерилизаторе (автоклаве). Многие питательные среды стерилизуют при давлении 1 атм в течение 15—20 мин, питательные среды с углеводами — при 0,5 атм в течение 15 мин. Стерилизация текучим паром осуществляется в автоклаве при незавинченной крышке и открытом выпускном кране. Данный способ стерилизации основан на антибактериальном действии пара в отно

шении вегетативных клеток. Он приме­няется в тех случаях, когда стерилизуемый материал не выдер­живает высокой температуры, например питательные среды с витаминами, углеводами.

16 Способы стерилизации лабораторкой посуды. Сушильно-стерилизационный шкаф (печь Пастера). Пред­назначен для суховоздушной стерилизации стеклянной лабо­раторной посуды и других жаростойких материалов (чашки Петри, пробирки, пи­петки и др.). Терми­ческая стерилизация предметов — обработка насыщенным водяным паром под давлением. Паровой стерилизации подвергают изделия из текстиля (белье, вату, бинты, шовный материал), из резины, стекла, некоторых полимерных материалов, питательные

среды, лекарственные препараты.

9 Способы определения чувствительности выделенной культуры к антибиотикам. Наиболее простым является метод бумажных дисков. Последние представляют собой небольшие кружки фильтровальной бумаги, пропитанные определённым количеством антибиотика. Диски, пропитанные различными антибиотиками, помещают на ча­шки с МПА, где сделан сплошной посев исследуемой культуры в виде смыва. Степень чувствительности к антибиотикам определя­ют после инкубации в термостате (сутки) по вели

чине зоны задержки роста вокруг каждого диска.

11 Механизм окраски микробоя по Граму. В результате фиксации огнем, несколько нарушается структура поверхностной стенки. У Грам+ разрушаются 2-3 слоя пептидогликана (ПГ), и изоставшихся слоев спирт за 30 сек. неуспевает вымыть генцианвиолет, и они остаются окрашены в синий цвет. Если воздействовать спиртом 2-3, то Грам+ можно обесцветить. Грам- стенка в результате фиксации огнем, становится более рыхлой, а спирт является жирорастворителем. Он вымывает краску за 30сек., и поэтому их докрашивают

фуксином (красный цвет).

14 Способы определения наличия у бактерии спор. Окраска по Ожешко – сначала разрыхляют оболочку НСl, нагревают, а затем окрашивают по методу Циля-Нильсена (промыть мазок водой > нанести 5% р-р серной к-ты на 1-2 мин. для обесцвечивания > промыть водой > докрасить мазок водным р-ром метиленового синего в течении 3-5 минут > промыть водой, высушить). Спора окрашивается в красный цвет.

2 Способы приготовления препаратов для изучения подвижности микробов. Косвенный метод выявления – подвижность бактерий определяют в живом состоянии, в темном поле зрения, в раздавленной или висячей капле. За подвижность отвечают жгутики.

3 Принцип иммунолюминесцентного исследования материала.. Основан на соединении а/г со специфическими а/т, мечеными флюорохромными красителями. Он используется в качестве диагностического экспресс – метода при многих вирусных инфекциях.

10 Метод окраски препаратов ио Граму. На фиксированный мазок кладут кусочек фильтр. бумаги и наливают р-р генцианвиолета на 1-2 мин->снимают бумажку, сливают краску и наливают р-р Люголя на 1 мин(мазок чернеет)->сливают Люголь и действуют спиртом в теч. ½-1 мин->промывают водой->доп. окрашивают фуксином на 1-2 мин(красный)

13 Способы определения наличия у бактерий капсулы. 1. Окраска по Бурри-Гинсу, капсула не окрашивается. 2. Окраска по Граму – окрашивается слабо. 3. Феномен набухания капсулы под действием антител. 4. Иммунолюменисцентный метод.

24 Способ получения и цель применения гемолитической сыворотки. Получают путем иммунизации кролика бараньими эритрацитами. Барану вводят а/г > берут у него кровь и иммунизируют кролика. Применяют в РСК.

12 Метод окраски препаратов по Цилю-Нильсеиу. На фиксированный мазок кладут кусочек фильтр. бумаги, наливают р-р фуксина и подогревают 3-5мин. до появления паров > снять бумагу промыть мазок водой > нанести 5% р-р серной к-ты на 1-2 мин. для обесцвечивания > промыть водой > докрасить мазок водным р-ром метиленового синего в течении 3-5 минут > промыть водой, высушить.

14 Общая характеристика механизмов изменчивости вирусов. Интегративный тип взаимодействия (вирогения) характеризует­ся встраиванием нуклеиновой кислоты вируса в хромосому клетки. Идет изменение генома вируса, т.е. мутации. ДНК вируса, находящаяся в составе хромосомы клетки, назы­вается ДНК-провирусом. При делении клетки, ДНК-провирус несет дополнительную генетическую инфор­мацию, в результате чего клетки приобретают ряд новых свойств. Так, встраивание может явиться причиной

возникновения ряда аутоиммунных и хронических заболеваний, разнообразных опу­холей. При внедрение ретровирусов в рибосомах образуются вирусные белки, сборка и почкование и вирус выходит захватив с собой компоненты клетки, в том числе компоненты клеточной мембраны, что подавляет иммунитет. Идет изменение генома вируса, т.е. мутации. Умеренные фаги (вирус) вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае гено­мом фага называют профаг. Био­

логическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бакте­рий, содержащая профаг, называется лизогенной. Изменение свойств мик­роорганизмов под влиянием профага называется фаго­вой конверсии. Фаги учавствуют в рекомбинативной форме изменчивости – трансдукции. Трансдукция — передача ДНК от бактерии-донора к бактерии-реципиенту при участии бактериофага. Умеренные фаги являются мощным фак­тором изменчивости микроорганиз

мов (кульиуральные св-ва, биохимических, токсигеных, антигенных). В основе изменчивости ви­русов лежат мутации. Присутствие нескольких типов вирусов в инфици­рованных клетках, т.е. смешанная инфекция, может приводить к мно­жественной реактивации, рекомбинации, кросс-реактивация; могут и негенетические взаимодействия — компле­ментация. Множественная реактивация — процесс взаимодей­ствия вирусов с поражением разных генов, в результате кото­рого взаимодействующие вирионы допол

няют друг друга благо­даря генетической рекомбинации, образуя неповрежденный ви­рус. Рекомбинация — обмен генетическим материалом меж­ду вирусами — возможна в виде обмена генами (межгенная ре­комбинация) или участками одного и того же гена (внутригенная рекомбинация). Негенетического взаимодействия вирусов может быть приведена комплементация: при смешанной ин­фекции стимулируется репродукция обоих участников взаимодей­ствия или одного из них без изменения генотипов виру

сов. Обмен генетическим материалом при этом не наблю­дается. Если геном одного вируса заключен в капсид другого виру­са, этот феномен называется фенотипическим смешива­нием, наблюдаемым при смешанной инфекции. Действие вирусов на клетку может привести: 1- трансформация клетки в злокачественную; 2- пролиферация (бородавки) идёт просто размножение; 3- изменение функциональной активности клетки; 4- изменение АГ свойств (клетка становится аутоантигеном); 5- выход дефектного вируса (ню).

1 Структура и принципы классификации бактериофагов. Бактериофаги (пожиратель) — вирусы бактерий, обладающие способностью специфически про­никать в бактериальные клетки, репродуцироваться в них и вы­зывать их растворение (лизис). Морфология. Имеет двунитчатую ДНК с сокращаюмщимся отростком. Форма зависит от типа симметрии капсомера. Если кубический–то форма многогранника, если по спирали то форма палочковидная. Имеют форму головастика или сперматозоида, кубическую и нитевид

ную формы. Имеющие форму сперматозоида состоят из вытянутой икосаэдрической головки и хвостового отростка . Внутри хвостового отростка имеется полый цилиндрический стержень, сообщающийся отверстием с головкой, снаружи — чехол, способный к сокращению наподо­бие мышцы. Хвостовой отросток заканчивается шестиугольной базальной пластинкой с короткими шипами, от которых отхо­дят нитевидные структуры — фибриллы. Химический состав . нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК) и белка. У фагов,

имеющих форму сперматозоида, двунитчатая ДНК упакована в виде спирали внутри головки. Белки входят в состав оболочки (капсида), окружающей нуклеиновую кислоту, и во все структурные элементы хвостового отро­стка. Обнаружены внутренние (геномные) белки, связанные с нуклеиновой кис­лотой, и белки-ферменты (лизоцим, АТФ-аза), участвующие во взаимодействии фага с клеткой. Резистентность. Ряд дезинфицирую­щих веществ (фенол, этиловый спирт, эфир и хлороформ) не оказывают существенного

влияния на фаги. Высокочувствитель­ны к формалину и кислотам. Инактивация наступает при температуре 65—70 °С, сохраняются при высушивании в запаянных ампулах, заморажи­вании при температуре —185 °С в глицерине. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги. При попадании в бактерию по своему взаимодействию могут быть вирулентными ,т.е. попав в клетку идет репродукция вируса и лизис бактерии. Некоторые фаги попав в бактерию не репродуцируются в ней, не вызывая

ее лизиса, а их ДНК включается в бактериальную хромосому это называется профаг. А сам фаг назыв. умеренным. А это явление ( биологический симбиоз микробной клетки с умеренным фогом (профагом) назыв. Лизогения, а культура бактерий , содержещий профаг, назыв. лизогенной. Лизогения это когда под действием внеш. факторов профаг выходит из интегрированного состояния и превращается в вирулентный ,т.е. идет репродукция фаговых частиц и лизис. Фаг включается в ДНК (нуклеотид) и может взять

кусок ДНК и передать другому – фаговая конверсия ( мощный фактор изменчивости микроорганизмов). По специфичнос­ти действия различают поливалентные фаги, способные взаимодействовать с родственными видами бактерий, моновалентные фаги, взаимодействующие с бактериями определенного вида, и типовые фаги, взаимодействующие с отдельными вариантами (типами) данного вида бактерий.

2 Механизм взаимодействия бактериофагов с клеткой. По механизму взаимодействия различают вирулентные и умеренные фаги. Ви­рулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, авто­номно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий. Эти фаги адсорбируются на по­верхности бактериальной клетки с помощью фибрилл хвостово­го отростка. В результате активации фагового фермента АТФазы происходит сокращение чехла хвостового отростка и внедрение стержня в клетку. В процессе “прокалыва

ния” клеточной стенки бактерии принимает участие фермент лизоцим, находящийся на конце хвостового отростка. Вслед за этим ДНК фага, содержаща­яся в головке, проходит через полость хвостового стержня и ак­тивно впрыскивается в цитоплазму клетки. Остальные структур­ные элементы фага (капсид и отросток) остаются вне клетки. После биосинтеза фаговых компонентов и их самосборки в бактериальной клетке накапливается до 200 новых фаговых ча­стиц. Под действием фагового лизоцима и внутриклеточного

ос­мотического давления происходит разрушение клеточной стен­ки, выход фагового потомства в окружающую среду и лизис бактерии. Один литический цикл (от момента адсорбции фагов до их выхода из клетки) продолжается 30—40 мин. По специфичнос­ти действия различают поливалентные фаги, способные взаимодействовать с родственными видами бактерий, моновалентные фаги, взаимодействующие с бактериями определенного вида, и типовые фаги, взаимодействующие с отдельными вариантами (типа

ми) данного вида бактерий. Умеренные фаги лизируют не все клетки в популяции, с частью из них они вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае гено­мом фага называют профаг. Профаг, не вызывая ее лизиса, передается по наслед­ству от клетки к клетке. Био­логическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бакте­рий, содержащая профаг, получила название лизогенной. Это отражает способ

ность профага самопроизвольно или под действи­ем ряда физических и химических факторов исключаться из хро­мосомы клетки и переходить в цитоплазму, т. е. вести себя как вирулентный фаг, лизирующий бактерии. Лизогенные культуры невосприимчивы к повторному заражению близкородственным фагом и приобретают дополнительные свойства, которые находятся под контролем генов профага. Изменение свойств мик­роорганизмов под влиянием профага получило название фаго­вой конверсии и касается

различных их свойств: культуральных, биохимических, токсигенных, антигенных, чувствительности к антибиотикам и др. Кроме того, переходя из интегрированного состояния в вирулентную форму, умеренный фаг может захва­тить часть хромосомы клетки и при лизисе последней перено­сит эту часть хромосомы в другую клетку. Если микробная клет­ка станет лизогенной, она приобретает новые свойства. Таким образом, умеренные фаги являются мощным фак­тором изменчивости микроорганизмов.

12 Особенности репродукции РНК- и ДНК-вирусов. Репродуктивная стадия когда в клетке накапливаются или репродуцируются вирусные частицы, т.е. клетка сама воспроизводит вирусные частицы. Репродукция ДНК –х вирусов идет в ядре, а у РНК-овых идет в цитоплазме на рибосомах. ДНК вир.. Идет адсорбция вируса на мембране , проникновение (эндоцитоз)-виропексис, депротонизация капсида (разрушение мембраны) и получаем ДНК самой клетки и нуклеиновую кислоту вируса. Образуется РНКзависимая

полимераза, которая направляется на рибосомы и образует ранние белки. Далее регуляторные и матричные (М) белки они нужны для прохода через мембрану клетки. Далее вирусная ДНК-полимераза, которая идет в ядро, где строительный материал где идет репликация ДНК. У вируса есть белковая оболочка. Клеточная полимераза идет в рибосомы и образуется капсидные белки. Далее идет сборка в цитоплазме из ДНК идут к видоизмененной мембране отптчковываются и забирают свойства нашей мембраны. Вирус

прикрывает себя нашими АГ. У РНК-х вирусов зависит от РНК+ и РНК-. РНК+ выполняет функцию информационной, матричной, транспортной. Сначало адсорбция, виролексис (то же самое что ДНК), депротонизация высвобождается РНК+ , которые идут к рибосомам и образуется длинные полипептидные нити. Протеазы делают их короткими. А другое направление: на матрице + образуются “ – “ (минус) это репликативная форма становится двунитчатой + и “– “ и с “ –“ идет репликация на + ниточек. Короткие нити

идут в рибосомы образуется РНК-полимераза идет синтез белковых структур. Идет сборка. Уходят через мембрану, испорченную М-белками. Ретровирусы (ВИЧ, онкогенные вир.) имеют фермент обратную транскриптазу. Она + . Обладают способностью встраиватся в хромосому клетки хозяина. РНК превращается в ДНК. Вирус попал в клетку путем слияния мембран, освобождается РНК+ (обратная транскриптаза), каторая на матрице РНК строит ДНК (минусовую). Клетка достраивает ДНК нормальную, кото

рая направляется в ядро и клеточные ферменты разрезают и встраивают вирусную ДНК в хромосом клетки. Клеточные ферменты образуют РНК+ , матричную вир. РНК и в рибосомах идёт синтез белковых структур (М, структурные и не структурные белков, шипы). Выход почкованием и захват кл. мембраны (фрагменты). РНК”-“. Унего РНК фрагментарная. Поступает в кл. слиянием мембран. Выход РНК- , кот. ничего не умеет делать. Образуется РНК+ , кот. идет в рибосомы, образуются структурные и не струк

турные белки это 1-е направление. 2-е направление: с помощью клеточной полимеразы где учавствует клеточная РНК-полимераза из + будут строится “-“ нити. Сборка. Отпочкование. Возможны мутации: где образуются с “-“ на + и идет из хромосом образуются ДНК полимеразы.

Похожие статьи

  • Лечение гепатита капельницей И.Г. Вена Н.И.В. (IG VENA N.I.V.) Действующее вещество: Фармакологическая группа Нозологическая классификация (МКБ-10) Состав и форма выпуска во флаконах по 20, 50, 100 и 200 мл соответственно; в пачке картонной 1 флакон. Описание лекарственной […]
  • Сульсена при отрубевидном лишае Салициловая кислота Описание актуально на 20.05.2015 Латинское название: Salicylic acid Код АТХ: D01AE12 Действующее вещество: Салициловая кислота (Salicylic acid) Производитель: ОАО “Фармстандарт”, ООО “Тульская фармацевтическая фабрика", […]
  • Антибиотики при ангине в уколах Кальция глюконат Описание актуально на 14.03.2016 Латинское название: Calcium gluconate Код АТХ: A12AA03 Действующее вещество: Кальция глюконат (Calcium gluconate) Производитель: Мосхимфармпрепараты им. Н.А.Семашко, Эском НПК ОАО, […]
  • 35 недель беременности простуда Описание актуально на 16.09.2015 Латинское название: Arbidolum Код АТХ: J05AX Действующее вещество: Умифеновир (Umifenovir) Производитель: Фармстандарт-Томскхимфарм ОАО (Россия) Состав Арбидола Действующий компонент, который входит в […]
  • Мазать ветрянку перекисью водорода Мазать ветрянку перекисью водорода Описание актуально на 05.02.2016 Латинское название: Iodum Код АТХ: D08AG03 Действующее вещество: Йод + [Калия йодид + Этанол] (Iodide + [Potassium iodide + Ethanol]) Производитель: Ярославская […]
  • Можно ли есть холодец при гепатите с Лечебные диеты: 1, 1а, 1б, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 10с, 11. Лечебное питание. Содержание статьи: Лечебные диеты: 1, 1а, 1б, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 10с, 11. Во время болезни, питание имеет большое значение не только для поддержания и восстановления сил, но […]